Metod för diagnostik av B12-brist vid anemi
Mikroskopi av antingen perifertblodutstryk eller benmärgsutstryk.
Vad kan man se med kolorimetriska test?
Blod eller socker i urinen.
Icke-enzymatiska metoder av kolorimetrisk analys
Kalcium + o-kresolftalein komplexon →
Kreatinin + pikrinsyra →
Fosfat + ammonium molybdat + ammonium metavanadat →
Enzymatiska metoder av kolorimetrisk analys vid glukosmätning
1) Glukos + ATP –hexokinas-> Glukos-6-fosfat + ADP
2) Glukos-6-fosfat –G-6-PDH-> Glukonat-6-P + NADPH + H+
Enzymatiska metoder av kolorimetrisk analys vid mätning av ALAT
1) L-alannin + 2-oxoglutarat —ALAT–> Pyruvat + L-glutamat
2) Pyruvat + NADH + H+ —LDH–> L-Laktat + NAD+
Metod för monitorering av Xa-hämmare
FXa (överskott) + Xa-hämmare (prov) –> FXa-hämmat + FXa (återstående)
PT/PK-prov genomförande
Klassisk metod med vattenbad i vilket man vickar provet med reagenser i och ser hur länge det tar att koagulera.
Modernare sätt: mekanisk koageldetektion där man använder magneter för att flytta metallkula fram och tillbaka. När man inte längre kan det för att blodet koagulerat får man mindre och mindre utslag för att kulan inte rör på sig längre.
Vad mäter en koagulationskurva?
Förändring över tid
Vilka olika immunokemiska metoder finns?
- Turbidometri och nefelometri
- RIA (radio immunoassay)
- ELISA
Hur går D-dimer analys till?
Latexförstärkt immunokemisk analys där vi mäter hur mycket D-dimer som finns i provet mha monoklonala antikroppar som är fästade på små latexpartiklar. När det finns D-dimer i provet kommer stavarna klumpa ihop sig och vi kan då mäta det som absorbans/transmittans i provet.
Analysprincipen för Troponin T Elecsys
Vi blandar ihop provet med Ruteniumkomplex, och Biotin som sedan binder till varandra och troponin-T i provet. Kemoluminiscent emission kan detekteras då spänning appliceras ifall troponin-T förekommer i provet.
Hur fungerar RIA?
Man blandar ak med provet som innehåller antigenet som ska mätas och en radiomärkt antigen. Sedan kan vi mäta bundna fraktionen mha radioaktivitet och fria fraktionen. Radioimmunoassay kan mäta från väldigt låga halter till väldigt höga halter. Används mindre nuförtiden för att problem med radioisotoper förekommit då de inte är så stabila.
Hur fungerar direkt ELISA?
Vi har ett immobiliserat antigen fast i ett membran. En konjugerad ak som är märkt läggs till. Om det finns antigen vi vill mäta så binder ak och mha konjugerade ak kan vi få en signal och då kan vi mäta hur mycket av antigenet som fanns i provet när vi lägger till substrat.
Hur går indirekt ELISA till och vilka olika typer finns det?
- Indirekt ELISA har en sekundär ak som har i sin tur en markör som kan mätas.
- Sandwich ELISA ett av de vanliga som är ofta mer specifik: fångande ak, annan ak som känner igen en annan epitop på ak och sedan en tredje ak som i sin tur har en tag som vi kan få signal från.
- Kompetitiv ELISA där vi får en tävling mellan ak som finns på antigenet som vi vill mäta och inhiberande antigen.
Vilka separationsmetoder med identifikation finns det?
Elektrofores: storlek eller laddning.
Högtryckskromatiografi (HPLC)
Gaskromotografi (GC)
Masspektrometri (MC)
Vad baserar sig plasma proteinelektrofores på?
Separation efter laddning.
Vilken teknik använder man för att separera molekyler efter laddning?
Plasma proteinelektrofores
Vad är M-komponent?
Bildas t.ex. vid myelom och är ett mått på sjukdomsaktivitet.
Hur går HPLC till?
- Vi har en bärarvätska som vi pumpar i en slang.
- I slangen injiceras provet.
- Sedan görs separation efter någon egenskap
- separerade ämnena passerar en detektor och då visualiseras de som olika toppar på kromatogramet.
Vad är HPLC?
High Performance Liquid Chromatography är en separationsmetod med identifikation.
Hur fungerar masspektrometri?
- Jonisering för att få fragment som sedan kan separeras mha magnetism
- Accelerator
- Deflektion i flight tube genom magnet
- Detektion
Vi kan mäta stora mängder med exakthet. Ofta kombineras någon separationsteknik med masspektrometri.
Hur fungerar jonselektiva elektroder?
Vi har två elektroder, en jonselektiv och en referens som stoppas in i provlösningen vi vill mäta. Jonselektiva elektroden har ett tunt membran och endast jonen vi vill mäta kan passera. vi får en potentialdifferens som kan mätas.
