Principes du caryotype
Observer l’ensemble des chromosomes
Quel type de prélèvement est nécessaire pour l’étude d’un caryotype ?
- Sang
- Liquide amniotique
- Moelle, ganglions, tissu tumoral
Conditions de transport du prélèvement
- température ambiante
- pas d’inhibiteur de croissance cellulaire
- tube d’héparine : sang ou moelle
- sérum physiologique : tissus
- pas de tube EDTA
Conditions de mise en culture
Reproduction des conditions un vivo
- éléments nutritifs : sels minéraux, facteurs de croissance
- incubation a 37 degrés
À quel stade peut-on observer les chromosomes ?
Fin de la prophase - début début de la métaphase
A quoi sert la Colchicine ?
Arrêt de la division cellulaire au stade métaphase
Comment obtient-on un caryotype ?
1) Choc hypotonique
2) Fixation
3) Étalement séchage
4) Marquage - Coloration
5) Capture et analyse
Quel est le but du choc hypotonique ?
Faire éclater les membranes cellulaires avec une solution pauvre en sel pour augmenter massivement l’entrée d’eau dans la cellule
Quel est le but de la fixation ?
Stopper les fonctions cellulaires et préserver la morphologie cellulaire avec du méthanol acide acétique
Quel colorant utilise-t-on pour un caryotype ?
GIEMSA
Quels sont les 2 différents marquages ?
- Marquage GTG
- Marquage RHG
Quel est la résolution d’un caryotype en MB ?
- Caryotype standard (en métaphase) : 10 MégaBases
- Caryotype Haute Résolution (prophase) : 5 MB
