Quelles sont les phases du cycle cellulaire
G1,S,G2,M
G1
Taille de la cellule atteint seuil critique
S
Réplication ADN
G2
Taille de la cellule à doublé
M
Cytoplasme et génome dupliqués sont répartis en 2 parts égales
Quelles sont les 2 façons de déterminer la longueur de chaque phase
1) proportion de chaque phase ds une population
2) cytometrie en flux (flow cytometry)
Proportion de chaque phase ds une population
M: Compter combien sont ds phase
S: eux marqué à la 3H-thymidine
G2: temps qu’une cellule marquée en S arrive en M (mitose et rouge)
G1: calculer
2) analyse cytometrie en flux
-Coloration avec DAPI permet mesure qté ADN/cellule/fluorescence
-population est diluée pour qu’une cellule a la fois est devant le détecteur
-ordi calcule % de cellules en G1,S, G2/M
pour les analyses biochimiques, les cultures synchronisées sont faits par quoi
- Exploitation de la forme des cellules en cultures
- Trieuse de cellules
Exploitation de la forme des cellules en cultures
Les cellules en culture ont une forme différente en M
Ex. Fibroblastes sont ronde en phase M et aplatie en G1,S,G2
Utilisation d’une trieuse de cellules
G1: donne un type de charge (-)
G2/M: donne un autre type de charge (+)
La division cellulaire chez les cellules animales dépend de quoi?
Facteurs externes
Les facteurs de croissance (mitogènes) influencent la décision de se diviser dans le plasma ou le sérum?
Dans le sérum
ex. Diapo 23 expérience montre sur boîte de pétri que à la confluence la prolifération s’arrête et quand on ajoute du sérum le CDC continue à nouveau
Exemple de facteur de croissance
PDGF (facteur de transcription dérivée des plaquettes)
-quand on se fait une coupure il y a coupure du vaisseau sanguin= coagulation du sang (activation plaquettes et globules) qui libère le facteur de croissance ds plaquettes pour stimuler synthèse nvx vaisseaux
Un autre exemple de facteur de croissance
Proteines pour entrer en phase S synthétisé
- RTK active Ras, qui active cascade MAPK, etc….signal abouti sur facteur transcription E2F qui sont sur des gènes codant pr protéines nécessaires pour entrer en phase S
Exemple de facteurs externes influençant la division cellulaire
Facteurs de croissance
Dépendance d’ancrage
Dépendance d’ancrage
Ex. Les RTK (la cellule est suspendue in agar)
-si cellule fait pas bcp de contact avk MEC= peu de chance de rentrer en phase S
-si cellule fait bcp de contact avk MEC= grande chance d’entrer en phase S
Résume: cellule aplatie dont plus de jonction cellule-matrice appelée points de contact focal
Quelles sont les jonctions avec la MEC et la cellule
Hemidesmosomes
Les liens avec la MEC utilisent quoi
Les intégrines= ont conformation active/inactive
-peuvent être activées par des liens avec MEC pour après lier des filaments d’actine ( à l’intérieur de la cellule)
Les ponts de contact focal sont quoi
Les extrémités des filaments d’actine liés aux integrines
(Contiennent des phosphotyrosines qui permet MEC d’activer voies de signalisation)
C’est quoi la FAK
Recepteur tyrosine kinase recrutées aux pint de contact focaux. S’autophosphoryle et lient la protéine kinase SRC
Comment sont lier SRC à FAK
Via leur domaine SH2. Domaine SH3 de SRC est lié à Ras-GEF Sos et activent voie de signalisation Ras
