2 grandes méthodes de dx des néopalsies?
- Cytogénécité : identifier sur les chromosomes les gènes mutés
ex : caryotype, FISH - Biologie moléculaire : identifier les gènes mutés via une étude GÉNÉTIQUE, et non chromosomique
ex : PCR, RT-PCR et Q-PCR
Au caryotype, on arrête la progression des chormosomes pour les isoler à quelle phase?
Métaphase
Avantages et désavantages du caryotype
A : identifie les grosses translocations et larges délétions (anomalies de structure)
D : anomalies doivent être larges pour être identifiées, PEU SENSIBLE et prend bcp de temps : pas utile pour les dx rapides, basse résolution
3 utilités du caryotype?
- Peuve de CLONALITÉ
- DIAGNOSTIC pour des maladies avec anomalies caractéristiques ex T(9,22) pour LMC : le caryotype avec 9,22 est un dx de LMC
- FACTEUR PRONOSTIC MAJEUR : observer certaines mutations qui ont BIN PRONOSTIC, vs certaines mutations qui ont MAUVAIS PRONOSTIC
Avantages et désavantages du FISH?
- Rapide : en 24H
- Pas besoin des cellules en métaphase : on les prend en interphase (ok meme si une cellule se réplique lentement, pas besoin d’attendre sa métaphase pour faire le FISH)
- Très sensible (500 cellules vs 20 pour le caryotype)
- DÉtecte les translocations et les aneuploïdies (ex délétions ou amplifications)
DÉSAVANTAGES: On doit chercher une anomalie pour utiliser la bonne amorce spécifique à la séquence qu’on pense mutée
Détecte des relativement grosses mutations uniquement –>pas de mutations ponctuelles minuscules
Avantages du RT-PCR vs PCR normal?
Test quantitatif : détecte le nb de mutations via la fluorescence visible durant la réplication
- Test quantitatif
- Test très sensible!
- Permet de mesurer la maladie résiduelle minime (MRM) selon la qté de mutations présentes
_____% des LMA ont un caryotype ______
Dans ces cas, on fait quoi à la place?
50% ont un caryotype normal
Si caryotype N, on fait biologie moléculaire à la place qui peuvent identifier mutations qui pemrettent un dx
___% de toutes les LMA ont une mutation ______
Cette mutation est de bon ou mauvais pronostic pour LMA?
Le fardeau allélique pour cette mutation indique quoi?
30% des LMA = FLT3 muté
Mauvais pronostic de LMA
Fardeau allélique variable = + on a de mutations, + le pronostic est PAS BON
Mutation FLT3 est associé avec LMA avec quelles caractéristiques? RÉpond comment à la chimio?
LMA +++++++ proliférative
HYPERLEUCOCYTAIRE (car LMA c’est logique)
Répond BIEN À LA CHIMIO, mais rechute presque assurée
FLT3 est quoi dans la cellule (la mutation du gène entraîne quoi)? QUels sont ses rôles?
FLT3 = récepteur à activité tyrosine kinase (récepteur du fct de croissance FLT3-L)
Rôles : survie, prolifération et différenciation des cellules hématopoïétiques
2 types de mutation pour le FLT3 et entraînent quoi au niveau du récepteur tyrosine kinase FLT3?
- 20-25% : MUTATION DUPLICATION INTERNE (ITD) dans exon 14
- —->activité constitutive du récepteur FLT3 (hausse survie, différenciation et prolifération des cellules lignée myéloïde) - MUTATION PONCTUELLE d835 (TKD) dans exon 20 : 5-10%
Traitements de 1ère ligne et entretien pour la LMA à mutation FLT3?
Nouveau traitement depuis jan 2020?
- MIDOSTAURIN (chimio) : pour FLT3 ITD et TDK
- SORAFENIB : entretien post greffe allogénique pour FLT3 ITD
NOUVEAU : GILTERINIB : traitement de rechute FLT3 ITD ou TDK en remplacement d’une chimiothréapie d’induction (pas tous les effets indésirables d’une chimio, c’est une pilule à la maison!)
Marqueurs caractéristiques aux labos de LMA promyélocytaire?
- CIVD : baisse des plaquettes + baisse du fibrionogène
- —-> entraîne TT/PT et TCA allongés : marqueur important - +++++ de granulocytes (indique myélocytaire)
- Bâtonnets d’Auer (indique myélocytaire)
Acronyme utilisé pour leucémie promyélocytaire?
Représente quel pourcentage des LMA?
FAB M3
Promyélocytaire : 3-10% des LMA
LMA promyélocytaire associé à quelle mutation?
Traité avec quoi?
RARa-PML T(15,17)
TRaité avec ATRA
Quelle est l’Action des gènes RARa et PML séparés , et pourquoi entraîne LMA quand mis ensemble?
RARa : PERMET DIFFÉRENCIATION DES CELLULES AVEC CONTACT AVEC agonistes (ACIDE RÉTINOÏQUE/vitamine D)
Assemblé avec
PML : facteur de régulation nucléaire
ENTRAÏNE RARa-PML: gène qui favorise prolifération (avantage de croissance) et bloque différenciation des myéloblastes au stade PROMYÉLOCYTE
entraîne un BLOC DE LA MATURATION ET HAUSSE DE LA CROISSANCE DES PROMYÉLOCYTES
2 méthodes utiles pour observer T(15,17) RARa-PML et pourquoi celles-ci en particulier (en relation avec caractéristique de cette LMA)?
POURQUOI ON UTILISE PAS UNE CERTAINE TECHNIQUE?
- FISH
- —> très rapide (LMA promyélocytaire = urgence médicale, besoin dx rapide) - Q-PCR (PCR quantitatif)
- —->détecte T(15,17) et utile dans détection de la maladie résiduelle minime (MRM)
PAS CARYOTYPE : MOINS PRÉCIS ET TROP URGENCE : ON A PAS LE TEMPS D’ATTENDRE
Utilisation ATRA seul pour LMA promyélocytaire : fonctionne bien?
Peut-on l’utiliser seul uniquement?
- Permet différenciation COMPLÈTE et RÉMISSION COMPLÈTE SANS CHIMIO!!
- —->avec le contrôle de la CIVD en plus!
- —->mais RÉMISSION COMPLÈTE MAIS COURTE ; rechute rapidement - ATRA + chimio ou ATRA + arsenic = guérison complète 85%!!!!! (chimio ou arsenic évite les rechutes)
- —->LMA promyélocytaire est la leucémie à avoir si on pouvait choisir, bon taux de guérison
Le turn-over cellulaire des lymphomes de BURKITT est de combien?
100% : très agressif, très gros turn-over cellulaire
Comment sont les cellules dans le lymphome de Burkitt?
Mutation dans le lymohome de burkitt?
- Expriment Ig de surface
- Cellules vacuolisées souvent
- Cellules de taille intermédiaire
T(8,14) MYC ou T(2,8) ou (8,22) MYC
% des Burkitt qui sont quelle mutation, et pourquoi entraîne cancer?
80% T(8,14) MYC
MYC = fct de transcription oncogène, superposé sur gène de chaîne lourde
20% T(2,8) ou (8,22), MYC sur les gènes de chaînes légères
technique idéale pour identifier MYC (8,14) et autre technique possible?
Pourquoi on utilise pas une certaine technique?
- FISH : grosse translocation bien visible
- Caryotype standard : plus long, alors moins idéal, mais montre la translocation
ON UTILISE PAS PCR ; breakpoint est trop large pour la mutation de mYC
En cas de polycythémie vraie, EPO est comment?
Quel est un sx dermato pour les PV?
DIMINUÉ : tente de compenser la polycythémie vraie en produisant le moins possible d’EPO qui pourrait augmenter encore + le nb de GR
PRURIT ou ROUGEUR CUTANÉE : par le ++++++ de GR
Correction p/r à ce qui est dans APP : quelles sont les valeurs de Hb et d’hématocrite pour qualifier une polycythémie?
Hommes : Hb > 165 g/L et hématocrite > 0,49
Femmes : Hb > 160 g/L et hématocrite > 0,48
