1
Q
Pourquoi les méthodes pour réduire et éliminer les microorgansimes sont importantes?
A
- Outils stériles lors d’une chirurgie
- Contaminer une chaîne de production alimentaire
2
Q
Comment préservait-on les aliments, il y a très longtemps?
A
- Salage
- Séchage
- Sucrage
- Cuisson
3
Q
Qu’est-ce que la stérilisation?
A
L’élimination complète ou la destruction de tous les microorganismes viables (forme végétative et forme sporulée). Utilisée sur les objets inanimés
4
Q
Qu’est-ce que la désinfection?
A
Désinfection: Destruction ou élimination des agents pathogènes végétatifs mais pas des endospores bactériennes. Ordinairement utilisée uniquement sur les objets inanimés.
5
Q
Qu’est-ce que la décontamination?
A
Réduction de la population microbienne à un niveau sans danger selon les normes d’hygiène publique. Utilisée sur les objets inanimés.
6
Q
Qu’est-ce que l’antisepsie?
A
Agents chimiques appliqués sur des surfaces du corps pour détruire ou inhiber les agents pathogènes
7
Q
Qu’est-ce que la chimiothérapie antimicrobienne?
A
Agents chimiques utilisés pour tuer ou inhiber la croissance de microorganismes à l’intérieur des tissus de l’hôte.
8
Q
Quelles sont les sortes de chimiothérapie antimicrobienne?
A
Antibactérien
Antifongique
Antiviral
Antiparasitaire
9
Q
Quels sont les deux types d’effets des agents antimicrobiens?
A
- Activité statique (Bactériostatique, fongistatique)
- Activité cide (Bactéricide, fongicide, algicide, virucide)
10
Q
Que font les agents antimicrobiens qui ont une activité statique? Est-ce réversible ou pas?
A
Inhibe la croissance des microorganismes sans les tuer: EFFET RÉVERSIBLE
11
Q
Que font les agents antimicrobiens qui ont une activité cide? Est-ce réversible ou pas?
A
Substances qui tuent les microbes : EFFET IRRÉVERSIBLE
12
Q
Quand allons nous utilisé un antimicrobien statique versus un cide?
A
Un bactériostatique pourrait être donné avec quelqu’un qui a un infection pour donner un coup de pouce à son système immunitaire.
Par contre quelqu’un qui est immunosupprimé aurait besoin d’un bactéricide.
13
Q
Que nous montre la courbe de létalité?
A
- Une population microbienne n’est pas tuée instantanément lorsqu’elle est exposée à un agent létal - La population est réduite à intervalles constants (taux de mortalité)
- Tout comme la courbe de croissance d’une population, la courbe de létalité est logarithmique. La pente de la droite est cependant négative
14
Q
Plus le taux de mortalité est grand plus la pente est?
A
plus la pente droite est forte.
15
Q
Quels sont les types de facteurs qui affectent l’efficacité d’un agent antimicrobien?
A
- Biologiques
- chimiques
- environnementaux
- durée d’exposition
16
Q
Quels sont les facteurs biologiques affectant l’efficacité d’un agent antimicrobien?
A
- Taille de la population
- Composition de la population
17
Q
Comment la taille de la population de microorganismes affecte l’efficacité d’un agent antimicrobien?
A
Il faut plus de temps pour détruire une grosse population qu’une petite (préférable de nettoyer avant d’appliquer le traitement)
18
Q
Comment la composition de la population de microorganismes affecte l’efficacité d’un agent antimicrobien?
A
Selon les caractéristiques de la population l’efficacité sera différente. EX:
Les endospores sont plus résistantes que les formes végétatives Les bactéries avec une capsule (glycocalyx) sont plus résistantes Les cellules plus jeunes plus vulnérables que les cellules matures
19
Q
Quels sont les facteurs chimiques qui affectent l’efficacité d’un agent antimicrobien?
A
- Concentration de l’agent
- Temps de contact
20
Q
Comment la concentration de l’agent affecte l’efficacité de l’agent antimicrobien?
A
- La plupart du temps l’efficacité croît avec la concentration d’un produit chimique ou l’intensité d’un agent physique
- Parfois un agent est plus efficace à plus faible concentration (Ex: l’éthanol est plus efficace à 70% qu’à 95%, car l’eau augmente son efficacité)
21
Q
Comment est la courbe d’efficacité d’un agent antimicrobien?
A
Elle n’est pas nécessairement linéaire
22
Q
Comment est affecté l’efficaté d’un agent antimicrobien par le temps de contact?
A
- Plus longue est la durée d’exposition, plus nombreux sont les microbes tués - Le temps de contact varie selon les agents chimiques/physique
23
Q
À combien faut-il réduire la probabilité de survie pour réussir une stérilisation?
A
-10^6 ou moins
24
Q
Quels sont les facteurs environnementaux qui affectent l’efficacité d’un agent antimicrobien?
A
- La température
- le pH
- La présence de matière organique
25
Comment la température affecte l'efficacité d'un agent antimicrobien?
- L’efficacité d’un agent croît généralement avec l’augmentation de la température
- À une température élevée on peut utiliser un agent en concentration moindre (coûts moins élevés)
26
Comment le pH affecte l'efficacité d'un agent antimicrobien?
- Modifie les charges électriques des macromolécules et influence la dissociation et l’ionisation
- Selon l’agent considéré le pH aura une influence positive ou négative Ex. : La chaleur tue plus facilement à pH acide
27
Comment la présence de matière organique affecte l'efficacité d'un agent antimicrobien?
-Les protéines ont une grande affinité pour de nombreux antiseptiques (réduit le nombre de molécules pouvant tuer les microorganismes) Ex:Action des antiseptiques diminuée par la présence de sang, pus
28
Quel sont les méthodes physiques pour le contrôle des microorganismes?
1) La température
2) La filtration
3) Les radiations
4) La pression osmotique
29
Est-ce que les basses températures tuent les microorganismes?
Non, elles ralentissent leur métabolisme et par conséquent leur multiplication (effet statique)
30
Que permet la réfrigération?
- Ralentit fortement la croissance et la multiplication microbienne, mais ne l’arrête pas complètement.
31
Que permet la réfrigération dans les laboratoires de microbiologie?
On peut conserver des microorganismes durant une longue période en les réfrigérant entre 4 et 7°C
32
Que permet la congélation?
- Une température de -20°C ou moins arrête la croissance des microorganismes (bactériostatique) à cause de la température basse et de l’absence d’eau liquide
33
Quelle est la température du congélateur? de la glace sèche? de l'azote liquide?
1. -18°C
2. -70°C
3. -195°C
34
Comment la congélation tue certains microorganismes?
Certains microorganismes seront tués par la rupture des membranes suite à la formation de cristaux de glace, mais la congélation ne détruit pas tous les microorganismes.
35
Que permet la congélation dans un laboratoire de microbiologie?
Permet aussi de conserver certains microorganismes.
| on met du glycrérol pour stabiliser les membranes
36
Comment agit la chaleur sur les microorganismes?
Elle agit en les tuant (bactéricide)
37
Comment agit la chaleur humide pour tuer les microorganismes?
La chaleur humide agit en dénaturant les protéines et l’ADN
38
Comment agit la chaleur sèche pour tuer les microorganismes?
agit par oxydation
39
En quoi consiste la stérilisation thermique?
consiste à tuer tous les microbes (forme végétative et forme sporulée) contenus dans une préparation (= effet bactéricide, sporicide, fongicide et virucide
40
Comment stérilise-t-on à chaleur humide?
Avec l'autoclave qui est un appareil hermétique. On y fait entrer de la vapeur d'eau qui remplace air qui y était présent (sorti d'air). La vapeur en excès aussi peut sortir. Pression monte ainsi que la T°. T° plus haute que 100°C.
41
Est-ce que l'autoclave tue aussi les endospores?
Oui
42
Quel est le cycle normal d'un autoclave pour stériliser?
15 minutes à 121°C sous 103,4kPa (1ATM) de pression.
43
Pourquoi la chaleur humide est plus efficace que la chaleur sèche?
La chaleur humide est plus pénétrante.
44
Quelles sont les avantages de l'autoclave?
- Simple
- Rapide
- Efficace
- Peu dangereux
45
Comment contrôle-t-on la qualité de l'autoclave?
En mettant un bandelette de spores bactérienne et en cultivant cette bandelette sur une gélose.
46
Comment procède-t-on à la stérilisation par la chaleur sèche?
Avec le four Pasteur et le flambage direct.
47
Pour quel object peut-on utiliser la stérilisation par la chaleur sèche?
- Objets en verre ou en métal, matières grasses peu miscibles avec l’eau
48
Est-il plus rapide de stériliser à chaleur sèche ou humide?
À chaleur humide.
49
En quoi consiste la désinfection thermique?
Consiste à tuer les pathogènes sans nécessairement stériliser
50
Quelles sont les 3 méthodes de désinfection thermique?
1. Ébullition
2. Appertisation
3. Pasteurisation
51
Comment faisons-nous une désinfection thermique par ébullition?
Eau bouillante pendant 10 minutes (100°C)
52
Quels microorganismes est détruits par l'ébullition?
- Ce procédé détruit rapidement les microorganismes non sporulants (bactéries végétatives) et la majorité des virus sans affecter les endospores
- Par contre, c’est un moyen pratique pour détruire les entérobactéries et les entérovirus
53
Est-ce que l'ébullition est une stérilisation?
NON
54
En quoi consiste l'appertisation?
- L'appertisation est un procédé de conservation des denrées alimentaires par l'ébullition (100oC) prolongée des aliments dans des récipients hermétiquement fermés (pas de contamination de l’air) (conserve)
55
Est-ce que l'appertisation est une stérilisation?
NON
56
En quoi consiste la pasteurisation?
- La pasteurisation est un procédé par lequel on expose un produit thermosensible à une température modérée (50-60°C ) pendant une courte période (30 min)
57
Pourquoi utilise-t-on la pasteurisation au lieu d'un autre désinfection thermique?
- La pasteurisation permet l'inactivation des microorganismes pathogènes sans altérer les caractères nutritifs et organoleptiques (couleur, saveur, odeur) des aliments
58
Est-ce que la pasteurisation est une stérilisation?
NON
59
Quels sont les 3 types de pasteurisation?
- Pasteurisation LTH (Low Temperature Holding) : 30 min à 62,8oC
- Pasteurisation HTST (High Temperature Short Time) : 15 sec à 71,7oC Ex: - Lait, jus et autres liquides thermosensibles
- Pasteurisation UHT (Ultra High Température) : 2 sec à 141,0oC
60
Comment détermine-t-on l'efficacité de la destruction thermique?
Avec le temps de réduction décimale (D) qui est le temps requis pour tuer 90% des microbes ou des endospores d'un échantillon à une T° spécifique.
61
Que permet la filtration?
réduire le nombre de bactéries dans une solution thermosensible ou même la stériliser si aucun micro-organisme n’a traversé le filtre
62
Lors d'une filtration, est-ce que les bactéries sont détruite?
-Les bactéries ne sont pas détruites, elles sont simplement retenues par le filtre.
63
Que doit-on faire au récipient qui reçoit le filtrat de la filtration?
Le récipient sous le filtre doit être préalablement stérilisé
64
Pourquoi la filtration peut ne pas donner un résultat stérile?
certains microorganismes sont plus petits que le diamètre des pores, ou n’ont pas de paroi (mycoplasmes, rickettsies, chlamydia, virus).
65
Comment filtre-t-on des solutions?
1. Avec un filtre épais ( pas de nos jours)
2. Membranes filtrantes qui sont des disques poreux de 0,1mm d'épaisseur. Leurs pores peuvent être de plusieurs grosseurs, mais généralement 0,2 micromètre.
66
Comment filtre-t-on l'air?
| L'ait devient-elle stérile?
en le faisant passer dans des filtres qui retiennent les microorganismes
-Oui
67
Donnez des exemples de filtration d'air?
Masques chirurgicaux, bouchons de ouate sur les flacons de culture, hottes à flux laminaire avec filtres HEPA (High-Efficiency Particulate Arresting) qui retiennent 99,97% des particules de 0,3 µm de diamètre
68
Quel est le spectre des rayons UV?
260nm-270nm
69
Est-ce que les rayons UV sont efficace pour tuer les microorganismes?
Les rayons UV sont très létales, car protéines de l'ADN absorbent les UV, mais les radiations ne pénètrent pas bien.
70
Quand utilise-t-on les rayons UV pour tuer des microorganismes?
-Désinfecter/décontaminer les surfaces, l’air et les matériaux qui n’absorbent pas les radiations UV(l’eau, …)
71
Est-ce que les radiations ionisantes sont efficaces pour tuer les microorganismes?
Excellents agents de stérilisation
72
Pourquoi les radiations ionisantes sont-elles efficaces pour stériliser?
car pénétration en profondeur dans les objets
73
De quels types de rayon sont les radiations ionisantes?
Rayons X et Gamma
74
Quelles sont les utilisations pour les radiations ionisantes?
- Stérilisation à froid d’antibiotiques, hormones, fils de suture, seringues en plastique, pansements, champs opératoires, boîtes de Pétri, aliments,...
75
Comment la pression osmotique permet de tuer les microorganismes?
-Une concentration élevée de sel ou de sucre autour des microorganismes crée un milieu hypertonique, ce qui provoque la sortie de l’eau de la cellule microbienne vers le milieu (plasmolyse et faible activité de l’eau).
76
Quels microorganismes pourrait survivre au salage ou au sucrage? (haute pression osmotique)
- Osmophiles
| - Halophiles
77
Quelle est la concentration de sel utilisée pour conserver les aliments? de sucre?
- 10 à 15%
| - 50 à 70%
78
Quels sont les agents chimiques pour contrôler les microorganismes?
1) Les composés phénoliques
2) Les alcools
3) Les agents oxydants
4) Les halogènes
5) Les métaux lourds
6) Les additifs de conservation
7) Les agents de surface
8) Les aldéhydes
9) Les gaz stérilisants
79
Quel fut le premier antiseptique et désinfectant utilisé à grande échelle?
Le phénol.
80
Pourquoi est-ce que nous n'utilisons plus le phénol?
irritation de la peau/ muqueuses et odeur désagréable
81
Dans quoi est encore utilisé le phénol?
Encore utilisé dans des onguents cutanés (Ex: ozonol) ou dans des pastilles pour le traitement des maux de gorge
82
Quel est le mode d'action du phénol?
- Endommage les membranes plasmiques (lipides), dénaturation des protéines à plus hautes concentrations
83
Pourquoi utilise-t-on des dérivés phénolés?
-Plus efficace et moins irritants que le phénol
84
Quelles sont les utlisations des dérivés phénolés?
- Désinfectants de surface dans les laboratoires et hôpitaux: (crésols) et commerciaux (Lysol ) (o-phényl-phénol)
- Antiseptiques: Usage courant: Triclosan dans savons antibactériens, dentifrices, mousses à raser, planches à découper, ustensiles de cuisine, …)
85
Comment agissent les alcools comme agent de contrôle microbien? Quels microorganismes sont détruits par l'alcool?
Ils sont des désinfectants et antiseptiques pour la peau. Ils agissent en dénaturant les protéines et en dissolvant les lipides membranaires.
- Ils sont bactéricides et fongicides, mais non sporicides
- Certains virus contenant des lipides.
86
Quels sont les types d'alcool utilisés?
-Étanol et isopropanol
87
Comment agissent les agents oxydants?
- Ils exercent une action antimicrobienne qui repose sur l’oxydation de constituants cellulaires par des radicaux libres
- Libération d’O2 lors de la décomposition des peroxydes peut inhiber la croissance de bactéries anaérobies dans les plaies profondes
88
Quels sont les agents oxydants utilisés? Quelles sont leurs utilisations?
Peroxyde d'hydrogène:
- Antiseptique à domicile et dans les hôpitaux
- Pas pour les plaies ouvertes (ralentit la cicatrisation)
- Très bon désinfectant pour les objets inanimés
- Sporicide à haute T°
- Dans lentille cornéennes, emballage aseptique
Peroxyde de benzoyle:
-Traitement des plaie infectées par des agents pathogènes anaérobies comme l'acné
Acide peracétique:
- Tue les bactérie végétatives et les mycètes
- tue les endospores et les virus
- Corrosif et toxique si contact direct
- Désinfection matériel médicale en agroalimentaire, industrie textile/papier.
L'ozone:
- Forme très réactive de l'oxygène
- bon agent antimicrobien, mais dipendieux
- Désinfection eau potable.
89
Quels sont les halogènes utilisés pour le contrôle des microorganismes?
Cl
I
Fluor
90
Contre quoi est utile l'iode?
-Actif contre tous les types de bactéries, de nombreuse endospores (à forte dose), différents mycètes et virus
91
Quel est le mode d'action de l'iode?
- Inactivation des enzymes/protéines en s’y fixant (iodation) et/ou en les oxydant (oxydation)
92
Quels sont les utilisations de l'iode?
-Nettoyage de blessures -Désinfectant: comprimé dans l’eau
93
Pourquoi utilise-t-on le fluor pour le contrôle des agents microbiens?
-À faible dose le fluor inhibe les enzymes et entraine ainsi la destruction des bactéries
94
Dans quoi ajoute-t-on du fluor?
- Pâte dentifrice et les rince-bouches, eau destinée à la consommation publique
95
Quelles sont les utilisations du chlore?
Désinfectant de choix pour l’eau (piscines,aqueducs) et le nettoyage des surfaces de travail (eau de Javel)
96
Quel est le mode d'action du chlore?
Sous forme de gaz: Cl2 + H2O = HCl + HClO (acide hypochloreux)
- Hypochlorite de sodium/calcium (eau de Javel): Ca(OCl)2 + 2 H2O = Ca(OH)2 + 2 HClO (acide hypochloreux)
Mode d’action de l’acide hypochloreux: HClO = HCl + O
- L’oxygène provoque une oxydation des constituants cellulaires et détruit bactéries, mycètes et virus mais pas les endospo 3r 5es
97
Quels sont les métaux lourds qui ont des propriétés désinfectantes ou antiseptiques?
Ag
Hg
Zn
Cu
98
Pourquoi est-ce que l'on n'utilise plus les métaux lourds pour le contrôle des agents microbiens?
ils ont été remplacés par d’autres agents moins toxiques et plus efficaces (beaucoup de métaux lourds sont plus bactériostatiques que bactéricides). Ne détruisent pas les endospores. Aussi, inactifs en présence de matière organique.
99
Quel est le mode d'action des métaux lourds?
- Inactivation des enzymes/protéines en s’y fixant (groupements sulfhydryles), ce qui les fait précipiter
100
Quels sont les utilisations des métaux lourds?
- Solution de nitrate d’argent à 1% dans les yeux des nouveaux-nés afin d’éviter l’ophtalmie gonococcique (antiseptique)
- Composés organiques/inorganiques du mercure tel que le mercurochrome et le merthiolate (antiseptique)
- Sulfate de cuivre (algicide), 8-hydroxyquinoléinate de cuivre dans la peinture afin de prévenir la croissance des moisissures.
101
À quoi servent les additifs alimentaire dans le contrôle microbien?
Retardent la détérioration des aliments
102
Quels sont les additifs alimentaires servant au contrôle microbien?
- Dioxyde de soufre
| - Acides carboxyliques: le benzoate de sodium, l’acide sorbique et le propionate de calcium
103
Dans quoi utilise-t-on le dioxyde de soufre comme désinfectant?
en vinification
104
Dans quel aliment est ajouté le propionate de calcium et pourquoi?
Le propionate de calcium est un agent fongistatique ajouté au pain
105
Pourquoi ajoute-t-on des acides carboxyliques aux aliments?
Préviennent la formation de moisissures dans les aliments acides tels que les fromages, les fruits et les boissons gazeuses
106
Quel est le mode d'action des acides carboxyliques?
Perturbent le métabolisme des microbes
107
À quoi sont ajoutés les nitrites ou nitrates de sodium?
à de nombreux produits carnés (jambon, saucisse, …)
108
Que permettent les nitrites?
-Permettent à la viande de conserver sa couleur rouge -Préviennent la germination et le développement d’endospores botuliques dans la viande
109
Quel est le mode d'action des nitrates?
inhibe les enzymes contenant du fer
110
Qu'est-ce que des agents de surfaces?
des substances tensioactives
- Molécules organiques amphipathiques (possèdent une extrémité polaire hydrophile et une extrémité non-polaire hydrophobe) qui réduisent la tension de surface entre les molécules. Ils peuvent s'insérer à l'interface eau/lipide.
111
Quel est le mode d'action des agents surfactants?
- Solubilisent les membranes et dénaturent les protéines
112
Quels sont les agents surfactants utilisés?
- Savons
- Détergents anioniques
- Détergents cationiques
113
Comment agit le savon?
- réaction d’un alcali avec un corps gras.
- Peu efficace comme antiseptique, mais joue un rôle important dans le lavage destiné à éliminer mécaniquement les microorganismes
114
Qu'est-ce que les détergents anioniques? Quel est leur mode d'action?
- Désinfectants à large spectre,principalement utilisés dans les lessives et produits de nettoyage Ex: Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) et en industrie alimentaire
- Mode d’action: altération de la membrane plasmique
115
Qu'est-ce que les détergents cationiques? Quel est leur mode d'action? Quelles sont ses utilisations?
- Désinfectants efficaces, solubilisent les membranes et dénaturent les protéines - Instruments en caoutchouc; nettoyage de la peau
116
Quels sont les détergents cationiques utilisés?
- Les composés d’ammonium quaternaires
- Le chlorure de benzalkonium (Zephiran)
- Le chlorure de cétylpyridinium (Cepacol)
117
Quels microorganismes peut tuer les composés d'ammonium quaternaires?
- Actifs envers les bactéries (essentiellement les Gram positives) - Fongicides, amibicides et actifs envers les virus à enveloppe lipidique - Inactifs contre les endospore
118
Quels microorganismes peut tuer Le chlorure de benzalkonium (Zephiran) et le chlorure de cétylpyridinium (Cepacol)
?
- Antimicrobiens puissants présents dans les rince-bouches - Tuent la plupart des bactéries, mais pas les endospores
119
Par quoi sont inactivés Le chlorure de benzalkonium (Zephiran) et le chlorure de cétylpyridinium (Cepacol)?
- Inactivés par de l’eau dure et les savons
120
Quels sont les aldéhydes utilisés dans le contrôle microbien?
la formaldéhyde et la glutaraldéhyde
121
Quel est le mécanisme d'action des aldéhydes?
Molécules très actives qui se combinent aux acides nucléiques et aux protéines, ils les inactivent par pontage et alkylation.
122
POurquoi dit-on que les aldéhydes sont des désinfectants et même stérilisants efficaces?
car sont bactéricides, fongicides, virucide, algicide,...
123
Que désinfecte-t-on avec les aldéhydes?
Le matériel médical sensible à la chaleur.
124
Avec quel gaz stérilisants stérilise-t-on?
Oxyde d'éthylène
125
Qu'est-ce que l'oxyde d'éthylène?
Agent alkylant.
| Microbicide.
126
Que vise l'oxyde d'éthylène?
L'ADN. même des spores bactériennes.
127
Que stérilise-t-on avec l'oxyde d'éthylène?
traiter des objets et instruments qui ne supportent pas la chaleur sèche ou humide.
(dans le domaine médicale)
128
Comment évalie-t-on l'efficacité d'un agent antimicrobien?
Avec le coefficient phénol.
129
En quoi consiste le coefficient phénol?
Comparer l'efficacité d'un désinfectant à celle du phénol.
On prend des dilutions de phénol et de l'agent désinfectant que l'on veut évaluer. On ajoute des bactéries à ces dilutions. Ensuite, on attend 5, 10 et 15 minutes et on fait des cultures sur géloses.
Pour le calcul:
on prend la dilution la plus élevée capable de tuer les bactéries après 10 minutes d'exposition Pénol =40, produit= 160.
Coefficient= inverse de dilution produit/inverse dilution phénol
=160/40= 4
Donc la conclusion serait que le produit est 4 fois plus fort que le phénol
130
À quoi faut-il porter attention lorsque l'on fait le calcul du coefficient phénol?
que l’efficacité peut varier lorsque l’agent est utilisé dans un usage in vivo
MCB 2956
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