Imunologia

Question 1

Célula que secreta anticorpos

Answer 1

linfócito B -> vira -> plasmócito

Question 2

O macrófago e as células dendríticas são exemplos de células apresentadoras de antígenos.

Verdadeiro ou Falso

Answer 2

Verdadeiro

Question 3

Cite os 2 órgãos linfóides primários

Answer 3

• medula óssea: hematopoese e maturação de células B
• timo: maturação de células T

nesse processo de maturação, essas células b e t são expostas a autoantígenos e caso não destruam estes, estão aptas para serem liberadas para os órgãos linfóides secundários.

Question 4

órgãos linfóides secundários

Answer 4

sistema linfático
linfonodos
baço
tonsilas palatinas e adenoides
tecido linfático no intestino (GALT, placa de peyer, apendice)

Question 5

Cite 4 tipos de linfócitos T

Answer 5

• linfócito T de memória
• linfócito T citotóxico (atua na imunidade celular)
• linfócito T supressor que modera a resposta imunológica (evita respostas imunológicas exacerbadas)
• linfócito T auxiliar (atua como mensageiro na expansão de linfócitos B)

Question 6

IMUNIDADE INATA/NATURAL

Answer 6

Epitélio, substancias antimicrobianas; células fagocitárias, células NK, mastócitos, sistema complemento e mediadores inflamatórios

• Presente ao nascer
• Não específica
• Não muda de intensidade com a exposição
• não há memória

Question 7

IMUNIDADE ADQUIRIDA OU ESPECÍFICA

Answer 7

Linfócitos B e T

• A partir da exposição
• Específica
• Aumenta a intensidade com a exposição
• Memória

Question 8

Os mecanismos efetores da imunidade inata são sempre usados para eliminar micróbios mesmo durante a resposta adaptativa.

V ou f

Answer 8

Verdadeiro

Question 9

A imunidade inata não estimula a resposta imune adaptativa, não influenciando em sua efetividade.

Answer 9

Falso

A imunidade inata estimula a resposta imune adaptativa e pode influenciar sua natureza tornando-a mais efetiva contra diferentes tipos de micróbios

Question 10

Anticorpos presentes na membrana do linfócito B

Answer 10

IgM e IgD

Question 10

IMUNIDADE ADAPTATIVA

• Demora cerca de dias para iniciar

Answer 10

• Demora cerca de dias para iniciar
• MHC 1 -> Ativado principalmente após exposições à vírus
• MHC 2 -> Ativado principalmente após exposições à bactérias

Question 11

IMUNIDADE ADQUIRIDA

RESPOSTA HUMORAL X RESPOSTA CELULAR

Answer 11

Humoral: Produção de anticorpos (Linf. B que se transformam em plasmócitos, céls de memória.) Ex: eliminação de bactérias

Celular: Resposta célula a célula (Linfócitos T agem destruindo células infectadas) Ex: eliminação de vírus, protozoários e fungos

Question 12

Ensaio imunoenzimático (EIE) ou Elisa (Enzyme - Linked Immunosorbent Assay)

Answer 12

-> Técnica imunoenzimática sensível, heterogênea (várias fases), para a quantificação de antígenos ou anticorpos

obs: 2) Tem uma fase de sensibilização, fase de bloqueio dos sítios antigênicos não ligados, fase de incubação;

1) Um dos reagentes é imobilizado na fase sólida, enquanto outro pode ser ligado a uma enzima, com preservação tanto da atividade enzimática como da imunologia do anticorpo;

enzima atua sobre um substrato, promovendo uma oxidação -> passando de um cromógeno incolor para um cromógeno colorido

a intensidade dessa cor pode ser proporcional ou não proporcional a concentração do analito pesquisado;

• teste muito sensível;
• detecção de substancias na grandeza de nanogramas 10ˆ9

Question 13

VARIAÇÕES DOS TIPOS DE ELISA

A) ELISA INDIRETO

Answer 13

1. Poço (Recipiente) já vem coberto com antígenos específicos no fundo; (fase sólida)
2. sofre vários processos de lavagem
3. adiciona-se a amostra do paciente no poço
4. Caso a amostra do paciente contenha os Ac específicos, formará a ligação Ac- Ag
5. nova lavagem
   6 . Retira tudo que não interessa (que não se ligou) e adiciona o conjugado enzimático (Ac secundário)( enzima peroxidase)
6. Nova lavagem
7. Esse anticorpo secundário será específico contra o anticorpo primario ja ligado ao antígeno especifico.
8. Adicionar substrato e medir a cor

Vantagens:
- Uso de um único Ac primário para detectar diferentes antígenos
- mais sensível do que o Elisa direto

Question 13

VARIAÇÕES DOS TIPOS DE ELISA

B) ELISA SANDUICHE

Answer 13

• Poço já vem com Ac aderidos
• Lavagem
• Adiciona o antígeno a ser medido (amostra do paciente)
• Lavagem
• Adiciona o conjugado enzimático (Ac secundário)
• Lavagem
• Adiciona o substrato e mede a cor

AC-AG-AC (Sanduíche)

Question 14

VARIAÇÕES DOS TIPOS DE ELISA

C) ELISA COMPETITIVO

Answer 14

• Incubar o Ac com o Ag a ser medido
• Adicionar a mistura Ag-Ac ao poço coberto com Ag (haverá competição
• Lavagem
• Adicionar o conjugado enzimático (Anticorpo secundário)
• Lavagem
• Adicionar o substrato e medir a cor (Se tiver cor, a reação é negativa) Se não tiver cor: reação positiva

Ou seja, o resultado é inversamente proporcional à concentração.

Question 15

VARIAÇÕES DOS TIPOS DE ELISA

D) ELISA DIRETO

Answer 15

• Dosagem de um Ac específico na amostra
• Menos sensível do que elisa indireto
• Poço já com antígeno
• Adicionado Ac em cada poço para ocorrer a reação;
• Ac primário conjugado já ligado a uma enzima
• formação de colorações;
• quanto maior a intensidade da cor, maior a concentração da substancia no analiso

Question 16

O método de elisa direto é menos sensível do que os outros métodos de Elisa

V ou F

Answer 16

Verdadeiro

Question 16

ELISA

o fato de aumentar mais um anticorpo, como no Elisa sanduíche, aumenta ainda mais a sensibilidade e especificidade do teste.

V ou F

Answer 16

Verdadeiro

Question 17

Na Elisa direto, um único anticorpo marcado é usado para detectar o antígeno, enquanto na ELISA indireto, 2 anticorpos são usados, um primário e um secundário (conjugado Ac+Enzima)

V ou F

Answer 17

Verdadeiro

Question 17

A elisa direto requer uma etapa adicional de lavagem em comparação a Elisa indireto.

V ou F

Answer 17

Falso.

É o contrário.

Question 18

NA Elisa direto, o antígeno é marcado, enquanto na elisa indireto, o anticorpo é marcado.

V ou F

Answer 18

Falso

É o contrário.

NA Elisa direto, o anticorpo é marcado, enquanto na elisa indireto, anticorpo é marcado.

Question 19

A elisa indireto é mais sensível que a elisa direto, devido ao uso de 2 anticorpos

V u F

Answer 19

Verdadeiro

Question 20

Na Elisa direto, a detecção é feita através da mudança de cor, enquanto na ELISA indireto, a detecção é feita através de fluorescência;

V ou F

Answer 20

Falso

Elisa indireto não é detectado por fluorescência.

Question 21

método ELISA indireto.

Answer 21

É utilizado para detectar anticorpos em uma amostra, a fim de quantificar as respostas imunológicas; a placa é primeiro revestida com um antígeno de captura específico, que imobiliza o anticorpo alvo e, este complexo de anticorpos de antígeno é então detectado usando um segundo anticorpo.

Question 22

Na ELISA direto, um único anticorpo marcado é utilizado para detectar o antígeno, enquanto na ELISA indireto, dois anticorpos são utilizados, um primário e outro secundário v ou f

Answer 22

verdadeiro

Question 23

QUIMIOLUMINESCÊNCIA - Igual ou mais sensível do que a ELISA. - Muito usado para dosagem de hormônios. - Baseada na emissão de luz produzida em algumas reações químicas de oxidação - A emissão e luz pode ser detectada ou medida utilizando-se luminômetros com tubos fotomultiplicadores (ex: diodo de silicone em estado sólido ou filme fotográfico como detector); - mais utilizadas envolvem reações de oxidação; - Exemplos de reagentes luminescentes: luminol e isoluminol, ésteres de acridina e decomposição catalisada pela fosfatase alcalina de adamantil 1,2- dioxetano aril- fosfato - permite maior automatização;

Answer 23

útil para triagem sorológica de várias doenças: hiv, htlv, CMV, hepatite b, c, sifilis, doença de chagas, etc;

Question 24

QUIMIOLUMINESCÊNCIA Pre - trigger: agente oxidante - peroxido de hidrogênio Trigger: hidróxido de sódio - eleva pH para que ocorra a reação Microparticula magnética marcada com Ac + antígeno alvo -> Conjugado derivado da acridina (anticorpo marcado com éster de acridina ou luminol) + adicionar soluções básicas ou acidas (ex: pre trigger e trigger) - depois um imã atrai a parte magnética para a parede do tubo; faz todos os processo de lavagem e depois faz uma reação de oxidação que emite uma detecção de luz que será percebida pelo aparelho de quimioluminescência.

Question 25

difícil para um caralho

Question 26

ELETROQUIMIOLUMINESCÊNCIA - é uma variação da quimioluminescência - envolve transferencia de elétrons na superfície de um eletrodo esse eletrodo gera um composto instável excitado que emite fóton de luz - principio luminóforo: (emite a luz) -> é a base de Rutênio (Ru) -> Rutênio é a substancia elétrica luminescente, mas precisa de outros componentes Ex: TPA (Triplopilamina)

Question 27

Western Blotting (WB): - é um procedimento em que as proteínas alvo são separadas pelo tamanho por eletroforese - após separação, essas proteínas são transferidas para uma membrana de nitrocelulose onde ficam imobilizadas - essa membrana é utilizada como suporte sólido para um ensaio imunoenzimático; - pode ser empregada para a pesquisa de antígenos, anticorpos (PRINCIPALMENTE ANTICORPOS) na detecção de várias doenças;

Question 28

Western Blotting (WB): Etapas:

Answer 28

1- Desnaturação de proteína na presença de SDS e aplicação no gel 2- Separação de antígenos proteicos por eletroforese em gel de poliacrilamida SDS 3- transferencia eletroforética de proteínas para a membrana 4- marcação de proteínas na membrana usando um Ac primário específico para o Ag de interesse, e um anticorpo secundário específico para o anticorpo primário conjugado a uma enzima. É adicionado um substrato que emite luz ao ser clivado pela enzima. (essa etapa parece ELISA) 5- uso de membrana marcada com Ac com substrato emissor de luz adicionado para a exposição ao filme;

Question 29

A técnica de Western Blot tem como molécula alvo uma proteína. A técnica de Northern Blot tem como molécula alvo o RNA A técnica de Southern Blot tem como molécula alvo o DNA

Question 30

REAÇÕES DE PRECIPITAÇÃO - Combinação de Ag solúveis + Ac solúveis = complexos insolúveis visíveis; - Influenciam na visualização dessa reação: a) concentração de antígenos e anticorpos (principal) Zona de equivalência: é o momento em que há uma quantidade ideal entre antígeno e anticorpo. (Evitando resultados falsos positivos ou falsos negativos) Zona de excesso de Ac: "Pró- zona" -> Para evitar o falso negativo: diluir a amostra. (Dilui seriada é a mais comum) Zona de excesso de Ag: "Pós-zona" ->Para evitar o falso positivo: concentrar a amostra.

Question 31

REAÇÕES DE PRECIPITAÇÃO - Imunodifusão radial dupla (ouchterlony immunodiffusion)

Answer 31

São colocados Ac e Ag ambos em uma placa Matrix de ágar. Cada um de um lado da placa. Ambos migrarão para o centro da placa e ocuparão o mesmo espaço, formando arcos precipitados visíveis. esse método é qualitativo: Positivo ou Negativo. Pode ser semi-quantitativo também: usando diluições 1/2; 1/4; 1/8; etc

Question 32

REAÇÕES DE PRECIPITAÇÃO - Imunodifusão radial simples

Answer 32

- é uma variação que permite avaliação quantitativa e qualitativa; - Imagina uma placa arredondada. Anticorpos colocados nas periferias e antígenos no centro da placa. Por difusão, de forma radial, haverá migração dos Ac a formação de um halo de precipitação visível. Vários fatores podem influenciar. quantitativo: Mede-se o diâmetro do halo de precipitação e joga numa curva padrão para avaliar. Quanto maior o diâmetro do halo, maior é a concentração;

Question 32

TESTES RÁPIDOS - Surgiu em 1980; - Resultados no máximo 30 minutos (decorar) - Fácil execução, sem necessidade de laboratório; - Amostra: sangue total obtida por punção venosa, polpa digital ou fluido oral;

Question 33

Variações de testes rápidos - Imunocromatografia de fluxo lateral

Answer 33

Area A: Local que pinga a amostra e pinga o tampão em cima. Aqui ficarão os Ac. Area I: (Intermediário) é a área do conjugado (Ouro coloidal +Imunoglob) T: área de teste (Ag específicos para detecção dos Ac) C: área de controle (Valida a reação) sempre precisa estar positivo, se não o teste é inválido.

Question 33

Qual é o principio laboratorial de todos os testes rápido?

Answer 33

Imunocromatografia

Question 34

Variações de testes rápidos - Imunocromatografia de dupla migração DPP

Answer 34

área 1: amostra + tampão (migra pra área 3) área 2: tampão (migra pra área 3 ) área 3: T: Ag + Ac + conjugado C: Reagente de controle + Conjugado mesmo ideia da Imunocromatografia de fluxo lateral

Question 35

Variações de testes rápidos - Imunocromatografia por imunoconcentração

Answer 35

A amostra é pingada em uma membrana de nitrocelulose com membrana absorvente e faz contato com antígenos específicos imobilizados. Haverá a formação de complexos Adiciona o conjugado aos complexos Reação positiva - formação de um círculo colorido na área de controle e na área de teste.

Question 35

Os testes rápidos são precisos e confiáveis, podem ser armazenados em temperatura ambiente. V ou F

Answer 35

Verdadeiro

Question 36

TÉCNICAS LABORATORIAIS FONTE LUMINOSA -->>> LENTE QUE CONCENTRAM O FEIXE DE LUZ --->>>> FEIXE DE LUZ INCIDE SOBRE O IMUNOCOMPLEXO EM SUSPENSÃO EM UMA SOLUÇÃO.. UMA PARTE DO FEIXE É DISPERSO (NEFELOMETRIA) OUTRA PARTE PASSA PELA SOLUÇÃO/ TRANSMITIDA PELA SOLUÇÃO = TURBIDIMETRIA - Nefelometria: Dispersão da luz em vários ângulos a partir da formação de imunocomplexos em solução dispersa. Usa: nefelômetro - Turbidimetria: mesmas condições dos sistemas nefelométricos, entretanto o sinal de detecção é a absorvância e transmitância e não a intensidade da luz dispersa. (Turbidimetria e luz Transmitida - associar o T) Não há desvio da luz. Usa: espectrofotômetro; O Nefelômetro consegue subtrair resíduos que poderiam atrapalhar o teste : ex: lipemia e hemólise.

Question 37

TÉCNICAS LABORATORIAIS REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO: Reação de Ac com Ag multivalentes presentes em partículas insolúveis.(visível) Aglutinação direta: partículas antagônicas insolúveis íntegras ou fragmentadas (hemácias, bactérias, fungos e protozoários) que podem ser aglutinados diretamente por anticorpos (pode usar partículas de látex também) reação de aglutinação tem boa sensibilidade. tanto na aglutinação direta quanto indireta, percebe-se num tubo a olho nu uma reação positiva ou negativa

Question 38

TÉCNICAS LABORATORIAIS REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO: hemaglutinação = subtipo da reação de aglutinação reagente a base de eritrócitos

Question 39

TÉCNICAS LABORATORIAIS REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO:

Answer 39

4-10: formação de botão = hemaglutinação positiva significa que houve ligacao de Ag eritrocitário com Ac do paciente testado formando um aglomerado visível uma diluição seriada permite um resultado semi quantitativo exames possíveis: tipagem sanguínea, Rh, Teste de widal ( detecção de salmonelose) + testes de toxoplasmose, doença de chagas,

Question 40

TÉCNICAS LABORATORIAIS REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO: --> Teste de Coombs: A) DIRETO: (tbm chamado de Hemaglutinação Direta ou Coombs Direto ou Teste da antiglobulina direta - TAD) descreva:

Answer 40

- Amostra já tem anticorpos sensibilizados na membrana eritrocitária. - Pingar o Reagente Soro de Coombs (Antiglobulina Humana) - Anti -igG - O reagente faz a ponte de ligação entre a fração Fc de um Ac ligado a uma hemácia a outro anticorpo ligado a outra hemácia; - Ocorre a formação de um aglomerado de hemácias, ( aglutinação) formando um botão e permitindo a visualização. Ou seja: - O teste de Coombs direto identifica uma sensibilização de hemácias in vivo: pode indicar anemia hemolítica auto-imune;

Question 41

TÉCNICAS LABORATORIAIS REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO: --> Teste de Coombs: B) INDIRETO: (Usa aglutinação indireta ou passiva) descreva:

Answer 41

- Coleta-se a amostra do paciente com intuito de detectar os Ac livres no soro. Suas hemácias não estão sensibilizadas previamente. - reagente: hemácias (contendo os Ag eritrocitários) "isca" - Objetivo: detectar Ac contra essas hemácias; - Obs: A sensibilização ocorre in vitro.

Question 41

Diferença Coombs direto e Coombs indireto

Answer 41

Coombs direto: a hemácia já está previamente sensibilizada - in vivo (Serve pra detectar hemácias sensibilizadas/ anticorpos ligados à hemácia) Coombs indireto: a hemácia/ látex/ gelatina ou levedura é sensibilizada in vitro, usando hemácias com antígenos eritrocitários; (Serve para detectar anticorpos livres no soro ou plasma)

Question 42

Prova cruzada: usado antes de todas as transfusão hemácias da bolsa de sangue x soro ou plasma do receptor in vitro

Question 43

O Teste de Coombs direto é utilizado para detectar anticorpos ou complementos já aderidos às hemácias do doador antes da transfusão. V ou F

Answer 43

Falso. Teste de coombs direto não é obrigatório em situações de transfusão. Não é usado para essa finalidade.

Question 44

O Teste de Coombs direto é aplicado para identificar anticorpos presentes no soro do paciente contra hemácias de um painel de doadores. V ou F

Answer 44

Falso. Anticorpos no soro. (Coombs indireto)

Question 45

Utiliza-se o teste de Coombs direto para diagnosticar a presença de autoanticorpos que reagem contra as próprias hemácias do paciente. V ou F

Answer 45

Verdadeiro. Tanto é que um dos principais usos do Coombs direto é na detecção de anemias hemolíticas auto-imunes.

Question 46

- REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO E SUAS VARIAÇÕES: 2. INIBIÇÃO DA AGLUTINAÇÃO: Adição de antígeno solúvel à amostra contendo anticorpos visando ao bloqueio dos sítios de ligação, para que não reaja com os antígenos presentes nas partículas sensibilizadas;

Answer 46

Principal exemplo: teste de gravidez. B- hCG URINA + Soro anti- hCG Se aglutinar = resultado NEGATIVO; Se não aglutinar = resultado POSITIVO;

Question 47

- REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO E SUAS VARIAÇÕES: 3. Floculação ou Aglutinação de cristais de colesterol:

Answer 47

(VDLR): emprega cristais de colesterol que são sensibilizados com lecitina e cardiolipina para a pesquisa de anticorpos cardiolipídicos da sífilis Floculação: teste + titulações feitas para evitar efeito prozona.

Question 48

- REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO E SUAS VARIAÇÕES:

Answer 48

--> Ensaios líticos: O resultado consiste na presença ou ausência de hemólise. etapa 1. - Ligação Ag-Ac que promove a ativação do complemento/ via clássica (consumindo todo o complemento) etapa 2. Adição do indicador da reação (hemácia de carneiro sensibilizadas com hemolisinas) ; (A hemólise ocorreria por ação do complemento) - Não hemólise: resultado positivo. significa que o complemento foi consumido. - Hemólise: resultado negativo. Significa que o complemento não foi consumido. (significa que não tenho o anticorpo lá no inicio da reação)