L’apparence des colonies sur une gélose dépend de quoi? (4)
- Espèce microbienne
- Conditions de l’incubation (temp, pH, gaz…)
- Milieu de culture utilisé
- Durée de l’incubation
Quel est l’aspect visuel des 3 types d’hémolyse?
- alpha-hémolyse: incomplète = verdâtre
- beta-hémolyse: complète = transparent ou jaune
- gamma-hémolyse: pas d’hémolyse = reste rouge
Quels sont les 2 traitements pour stériliser?
- Chaleur sèche: four Pasteur à 170C pour 2h et plus
2. Chaleur humide: autoclave à 120C pour 15-30 mins
Qu’est-ce qu’un milieu de culture sélectif?
Permet la croissance d’un type particulier de microorganisme tout en inhibant les autres.
Qu’est ce qu’un milieu de culture différentiel?
Permet de mettre en évidence une caractéristique ou propriété particulière à une espèce microbienne.
Donner 2 exemples de milieux sélectifs et différentiels.
- Gélose MacConkey (McC)
2. Gélose Mannitol-Sel (MSA)
Quels sont les principes sélectifs et différenciels de la gélose MacConkey?
Sélectif:
- Présence de sels biliaires qui inhibent les bactéries non-entériques Gram- et certaines bactéries Gram+
- Présence de violet de cristal qui inhibe la croissance des Gram+
Différenciel: présence de lactose
Vrai ou faux: les bactéries Gram+ poussent sur les McC.
Faux: le violet de cristal inhibe les Gram+, ce sont certains Gram- qui peuvent pousser sur les McC.
Quel est le rôle du lactose retrouvé dans les McC?
Les McC contiennent un colorant indicateur rouge:
- Les bactéries capables de métaboliser le lactose (lac+) acidifieront le milieu qui donnera une coloration rouge aux colonies.
- Les bactéries incapables de métaboliser le lactose (lac-) resteront blanchâtres.
Donner 2 exemples de colonies qui sont rouges sur un McC. Et 2 qui seront blanches.
Rouges (lac+):
E. Coli et Enterobacter
Blanches (lac-):
Salmonelle et Shigella
Qu’est ce qu’une colonie rouge représente sur une McC? Et un halo jaunâtre?
Rouge = acidification du milieu suite au métabolisme de lactose. Jaunâtre = alcinisation
Quels sont les principes sélectifs et différenciels de la gélose Mannitol-Sel?
Sélectif:
1. Présence de NaCl à 7.5%
Différenciel:
- Présence de mannitol
- Présence de rouge phénol
Quel est le rôle du mannitol et du rouge phénol retrouvé dans les MSA?
S. aureus peuvent métaboliser le mannitol qui produit de l’acide, ce qui donne une couleur jaune car le rouge phénol devient jaune en milieu acide.
Vrai ou faux: des colonies rouges sur une gélose MSA indique la présence de S. aureus.
Faux: c’est la présence de colonies jaunes qui indique la présence de S. aureus.
Que veut dire l’accroynyme ELISA?
Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay
Tu veux faire un test pour la présence de E. coli, quelle gélose utiliseras-tu?
MacConkey
Tu veux faire un test pour la présence de S. aureus, quelle gélose utiliseras-tu?
Mannitol-Sel
Nommer les 2 microorganismes utilisés dans la fabrication de yogourt.
- Lactobacillus bulgaricus
2. Streptococcus thermophilus
Tu veux faire un yogourt moins acide, tu utiliseras une majorité de quelle bactérie?
S. thermophilus.
La plupart des fromages utilise des bactéries de quel genres? (2)
- Lactococcus
2. Leuconostoc
Quelles sont les 4 étapes de la coloration de Gram?
- Frottis est coloré avec le cristal de violet (coloration basique)
- Frottis est traitée avec une solution d’iode (habituellement une solution de Lugol) pour bien fixer la couleur.
- Frottis est lavé (décoloré) avec de l’ethanol ou de l’acétone: les Gram+ gardent la couleur violet et les Gram- se décolorent
- Frottis est contre-coloré par la safranine (coloration basique) qui colore les Gram- en rouge.
Après une coloration de Gram, quelle couleur seront les bactéries?
Gram+: violet
Gram-: rouge
Quel(s) bactérie(s) observée(s) en labo sont Gram-?
E. coli
Quel(s) bactérie(s) observée(s) en labo sont Gram+?
S. aureus
Streptococcus thermophilus
Lactobacillus bulgaricus
