Lesão e Morte Celular

Question 1

Define homeostasia:

Answer 1

Manutenção de um equilíbrio num sistema quando é perturbado, mantendo certas condições dentro de um range.

Question 1

Qual é o primeiro compartimento celular que sente as mudanças do ambiente?

Answer 1

A membrana plasmática, através do transporte para dentro ou fora, ativação de recetores ou fatores solúveis

Question 2

Distinção entre morte “por suicídio” e “por lesão”:

Answer 2

• Suicídio - Apoptose: célula ativa um mecanismo e morre
• Lesão: célula morre passivamente devido a uma lesão

Question 3

Características apoptose:

Answer 3

• encolhimento das células
• condensação e fragmentação da cromatina
• formação de corpos apoptóticos que são libertados e fagocitados
• formação de bolhas da membrana plasmática
• não há libertação de componentes celulares para o meio, não ocorrendo inflamação
• processo fisiológico

Question 4

Características necrose:

Answer 4

• inchaço da célula
• núcleo intacto
• rutura da membrana com expulsão de conteúdo celular para o meio
• aumento de granulidade citoplasmática

Question 5

Situações fisiológicas onde ocorre apoptose:

Answer 5

• eliminação de células B e T autorreativas durante a maturação (seleção negativa)
• regeneração do tecido, para manter um número populacional em tecido em que há muita replicação celular (pele, intestino)
• eliminar excesso de células após uma resposta inflamatória, para prevenir inflamação crónica
• eliminar células danificadas por vírus
• eliminar células danificadas e perigosas (alterações no DNA devido a radiação, etc)

Question 6

Exemplo de membro da família Bcl-2 pro-apoptótico e ant-apoptótico.

Answer 6

• Pró: Bax, Bad
• Anti: Bcl-2

Question 7

Descrição da via apoptótica intracelular:

Answer 7

Presença de um estímulo (ex: ROS) → proteínas pró-apoptóticas migram para a mitocôndria (durante um tempo, as anti-apoptóticas tentam inibi-las, mas quando o estímulo é demasiado grande, Bax alcança a mitocôndria → Bax forma poros na membrana da mitocôndria → leakage de citocromo c (componente da cadeia de transporte de eletrões) → liga-se a pro-caspase 9 e Apaf-1, levando à formação do apoptossoma → apoptossoma cliva pro-caspase 3 em caspase 3 (protease ativa)

Question 8

Que sinais libertados pela mitocôndria podem levar à ativação da apoptose?

Answer 8

• Citocromo c
• Smac/DIABLO - inibe os inibidores de apoptose

Question 8

Targets da caspase 3:

Answer 8

• regulador negativo da endonuclease (CAD) → atividade de CAD mais elevada → clivagem de DNA
• proteínas de citoesqueleto → a actina contrai, puxando a membrana para fora (aspeto de bolhas), sendo depois clivada e libertados corpos apotóticos

Question 9

Eat me signal na apoptose:

Answer 9

Flip-flop dos lípidos da membrana (fostatidilserina passa a estar virada para o espaço extracelular e é reconhecida por células do sistema imune que vão fagocitar)

Question 10

Problemas que advém de apoptose excessiva ou insuficiente:

Answer 10

• Excessiva: neurodegeneração, isquemia, insuficiência cardíaca, rejeição de alografos, infeções virais e bacterianas
• Insuficiente: tumores, doenças autoimunes, infeções persistentes

Question 11

Dificuldades em inibir a apoptose:

Answer 11

• processo é redundante → muitas maneiras de ativar a apoptose e bloquear um pode não dar em nada
• até que pontos queremos manter células que estão comprometidas
• não sabemos todas as funções das caspases (ex: proliferação, inflamação) → bloqueá-las pode dar consequências que não conhecemos

Question 12

Via da inflamação pelo TNF:

Answer 12

Ligação TNF → ativação RIPK1 → ativação NF-kB (fator de transcrição pro-inflamatório)

Question 13

Diferenças na presença/ausência da caspase 8:

Answer 13

• Presença: caspase 8 liga-se a FLIP → clivagem de RIPK1 e RIPK3 e clivagem das caspase 3 → apoptose
• Ausência: RIPK3 recruta MLKL → MLKL é fosforilado e vai formar poros na membrana → necrose

Question 14

Mecanismos de proteção contra proteínas danificadas:

Answer 14

• ubiquitinação das proteínas → degradação no proteossoma
• autofagia
• CMA (chaperones mediated autophagy): chaperons target as proteínas para os lisossomas

Question 15

Diferença entre micro e macroautofagia:

Answer 15

• Macro: conteúdo que precisa de ser destruído rodeado por uma membrana (formam-se autofagossomas qu depois se funde com os lisossomas)
• Micro: autofagia diretamente do citosol (componentes incorporados em lisossomas, sem formação de autofagossomas) → pode ocorrer em situações de starvation para adquirir nutrientes do citosol

Question 16

Descrição macroautofagia:

Answer 16

Formação de uma dupla membrana dentro da célula que envolve o material a ser degradado numa vesícula chamada autofagossoma → autofagossoma funde com um lisossoma, formando autolisossoma com enzimas hidrolíticas que degradam o material

Question 17

Descrição de UPR:

Answer 17

• resposta mais robusta da célula a misfolding proteínas dentro do ER
• sensores na membrana do ER que sentem a presença de misfolding proteínas e quando ativados levam a uma pausa na tradução de proteínas “normais” mas aumento da tradução de chaperonas (proteínas protetoras que levam ao folding correto das proteínas)

Question 18

XIAPs promovem ou inibem a apoptose?

Answer 18

Inibem, por isso são usados antagonistas de XIAPs para promover a apoptose

Question 19

Exemplo de mecanismo endógeno de proteção:

Answer 19

Sistema Nrf2-ARE:
- em condições fisiológicas, KEAP1 marca Nrf2 para degradação
- em condições de stress, KEAP1 deixa de interagir com Nrf2, e este desloca-se para o núcleo, onde ativa genes ARE (com funções de proteção)