1
Q
lipides hydrophobes
A
- structure hydrocarbonée
- triglycérides, cérides, stérides
2
Q
lipides amphiphiles
A
- tête polaire / queue hydrophobe
- AG, cholestérol, phospholipides, sphingolipides
3
Q
interactions des différents lipides avec l’eau
A
- lipides hydrophobes : insolubles/non miscibles
- lipides hydrophiles : monocouche (émulsion)
=> 2 compartiments de compo différentes - lipides amphiphiles : bicouche
=> 2 compartiments aqueux
4
Q
définition membrane
A
enveloppe séparant le milieu environnant et le milieu intérieur de la cellule
5
Q
différentes zones de la membrane
A
1) barrière entre compartiments aqueux
2) passage entrée/sortie
3) point privilégié pour le transfert d’infos :
=> signal extérieur reste à l’extérieur mais modifie des éléments protéiques qui vont codifier l’extérieur et permettre la transmission
4) zone de contact avec l’environnement
5) lieu de réactions biochimiques (enzymatiques)
6) zone associée aux mouvements cellulaires (expansion..)
6
Q
Caractéristiques de la membrane
A
- bicouche lipidique avec protéines insérées
- asymétrique : 2 feuillets (types de protéines différents)
- composition variable
- renouvellement CONTINU
7
Q
Où se trouvent les sucres ?
A
sur le feuillet externe exclusivement
=> sinon marqueur de la mort de la cellule
8
Q
Membrane en microscopie électronique
A
- x50000
9
Q
Cryofracture en microscopie électronique
A
- congélation en azote
- lame
- ajout de sels de platine
- membrane étudié de l’intérieur
- toutes membranes
- localisation et quantification des complexes protéiques
10
Q
Pourquoi la cryofracture se réalise-t-elle toujours à très basse température?
A
pour éviter la cristallisation de l’eau et l’explosion des structures cellulaires
11
Q
Composition chimique de la membrane
A
- deux composés majoritaires :
- lipides à 65-70%
- protéines à 30-35%
(* glycannes : sucres)
=> taux variables selon le type de cellule
12
Q
caractéristiques des lipides membranaires
A
- tous amphiphiles
- DL implique un coude (épaisseur plus importante pour des acides gras insaturés)
- formation spontanée en bicouche
13
Q
classes de lipides
A
- dérivés du glycérol (glycérolipides)
- dérivés de la sphingosine (sphingolipides)
- autres phospholipides
- cholestérol
14
Q
Quel type de lipides est le plus abondant?
A
phospholipides
15
Q
dérivés du glycérol (glycérolipides)
A
- phosphatidylcholine (PC)
- phosphatidylsérine (PS)
- phosphatidyléthanolamine (PE)
16
Q
dérivés de la sphingosine (sphingolipides)
A
- sphingophospholipides (tête protéinée)
- glycosphingolipides (tête sucrée)
17
Q
autres phospholipides
A
- phosphatidylinositol
18
Q
cholestérol
A
- tête hydrophile et GRANDE queue hydrophobe
- enchassé dans la partie hydrophobe
19
Q
Quelle est la proportion de cholestérol parmi les lipides?
Quelle est la conséquence de l’augmentation de la concentration en cholestérol?
A
- 1/5
- plus la cellule devient rigide
20
Q
répartition dans l’espace des lipides
A
- cylindrique : pas de courbe -> PC et SM
- cône inversé : courbe + -> glycosphingomyéline
- cône : courbe - -> cholestérol, PE et DAG
21
Q
rôle des lipides membranaires
A
- barrière entre 2 compartiments
- organisation en domaines créant des zones privilégiées pour la fixation de protéines
- fixation de protéines (extramembranaires)
- rôle important pour la signalisation intracellulaire
- précurseurs de signaux intra et extracellulaire
22
Q
Quel type de lipides possèdent un domaine transmembranaire plus important?
Quel est la caractéristique de ce domaine propre à la nature de ces lipides?
A
- lipides
- moins de fluidité
23
Q
répartition des lipides dans la cellule
A
- Membrane plasmique : différents phospholipides sur les 2 versants :
- interne : PS et PE
- externe : PC et SM
- RE : mêmes phospholipides sur les 2 versants
- cholestérol : partie hydrophobe de la membrane
- glycolipides : partie extérieure de la MP uniquement
24
Q
processing intra-cellulaire
A
- symétrique dans le RE (double-sens)
- synthèse de la SM dans le Golgi : répartition asymétrique
- translocation PE et PS (vers l’extérieur)
- SM et PC sur le versant extracellulaire
25
Caractéristiques du cholestérol
- synthétisé à la membrane du RE
- échanges directs avec la MP ou passage par le Golgi
- l'excès est stocké dans des vésicules lipidiques
- échanges avec les mitochondries
26
répartition en domaines
- rafts
- zones d'invagination
- zones de confinement transitoire
- zones de lipides "fluides"
27
définition rafts
- domaines enrichis en glycosylphosphatidylinositol (protéine GPI) et sphingolipides
- rassemblement de lipides associés à des GPI
28
définition GPI
glycolipide qui permet l'ancrage des protéines à la membrane cellulaire
29
définition zone d'invagination
- caveolae
| - protéine = caveoline
30
définition zone de confinement transitoire
récepteur lié à son ligand confinés puis internalisés dans la cellule
31
Quel est le point commun des rafts et des caveolaes?
même composition lipidique
32
Caractéristiques des rafts
- contiennent des glycolipides saturés cibles de multiples agents extracellulaires
- transmission de signaux intracellulaire
33
Caractéristiques des protéines membranaires
- répartition asymétrique :
* côté extracellulaire : glycoprotéines en contact avec la MEC
* côté intracellulaire : non glycosylés en contact avec le cytosquelette
- 2 classes :
* protéines intrinsèques
* protéines extrinsèques
34
Caractéristiques des protéines intrinsèques
- contact direct avec les lipides (70%)
| - solubilisées par les détergents
35
Caractéristiques des protéines extrinsèques
- pas de contact direct avec les lipides (30%)
- interactions NON COVALENTES entre protéines
- solubilisées par force ionique
36
2 types de protéines intrinsèques
- ancrage par une protéine
| - ancrage par un lipide
37
Caractéristiques de l'ancrage par un protéine
- protéine transmembranaire
- domaine en hélice :
* acides aminés de nature hydrophobe
* unique ou multiple
- hélice :
* hydrophobe
* amphiphile -> canal aqueux
38
Caractéristiques de l'ancrage par un lipide
- liaison COVALENTE entre la protéine et un élément lipidique
- domaine unique
- lipide :
* AG : palmitique ou myristique
* phospholipide : PI
- protéine liée aux acides aminés des extrémités ou intrachaîne
39
fonctions de l'ancrage par une protéine
- élément structural (canal ou récepteur)
- assure la continuité pour la transduction des signaux
- peut servir de voie de passage au travers de la membrane
40
fonctions de l'ancrage par un lipide
- assure la mobilité
- n'appartient qu'à un SEUL feuillet, ne traverse pas la membrane
- n'est pas une solution pour le passage (transmembranaire)
41
fonctions des protéines membranaires
- transport transmembranaire : canaux/pompes -> transfert de mols
- réception d'infos : récepteurs -> transduction du signal
- adhérence : protéines d'adhérence -> interactions avec la MEC ou cellule ou cytosquelette
- transformation de mols enzymes -> interactions chimiques
42
Glycannes (type de liaison/différents types)
```
Liés de façon covalente
- glycoprotéines :
* chaîne glycannique plus ou moins longue et ramifiée
* AA particuliers :
=> Ser, Thr -> O glycoprotéines
=> Asp -> N glycoprotéines
- glycolipides :
* chaîne glycannique plus ou moins longue et ramifiée
* liée à la sphingosine
```
43
protéoglycannes membranaires
- petits protéoglycannes
- domaine extramembranaire
- nombre variable de chaîne
44
Caractéristiques des glycannes
- feuillet externe uniquement
- enchaînement d'oses variables (sauf protéoglycannes)
- forment le glycocalyx (zone de sucres)
45
Rôles des glycannes
- protection de la MP
- charge négative (acides sialiques)
- récepteurs et reconnaissance (marqueurs de différenciation, individuels)
- signalisation intracellulaire
- piégeage : mise en réserve d'ions et de petites mols pour le glycocalyx (protéoglycannes)
46
architecture fonctionnelle
- bicouche = triple épaisseur
- rigidité et forme cellulaire en rapport avec les interactions des protéines membranaires avec :
* éléments du cytosquelette : toutes cellules
* éléments de la MEC : sauf circulantes
- fluidité : structure dynamique, composants mobiles interagissant de façon transitoire
- notion de MOSAÏQUE FLUIDE
47
Mouvements membranaires des lipides
- diffusion latérale
- flexion
- rotation
- flip flop (bascule d'un feuillet à un autre)
48
Quels facteurs font varier la fluidité membranaire?
- température
- insaturation
- cholestérol
49
Quel type de molécule nécessite le flip flop?
enzymes
50
Mouvements membranaires des lipides (types, caractéristiques et rôles)
- ancrage lipidique : mobilité importante
- ancrage protéique : moins mobile
- deux types de mouvement : rotation et diffusion latérale
- mouvements :
* restreints à certains domaines
* modulés par les interactions des protéines
- rôles :
* capping
* adhérence
51
éléments différenciés
- différenciations morphologique ou fonctionnelle
- augmentation de la surface
- éléments mobiles (cils et flagelles)
52
Quels objets permettent d'augmenter la surface de la membrane?
- microvillosités : expansions cytoplasmiques
- replis du pôle basal :
* espaces cytoplasmiques
* surface pour transfert nécessitant de l'énergie
53
définition pôle basal
pôle qui repose sur la base en contact avec la MEC
54
Caractéristiques des jonctions intercellulaires
- élément différencié de la membrane
- zones de différenciation : adhérence intercellulaire
- présentes dans de nombreuses cellules
- stabilisées par des interactions faibles multiples
55
Structure des jonctions intercellulaires
- regroupement de mols :
* CP : protéines associées (mols de liaison)
* transmembranaires : mols d'adhérence
56
Classification des jonctions intercellulaire
- 3 types de jonctions d'adhérence différents
| - jonctions communicantes (échanges directs)
57
jonctions d'adhérence
- serrées : empêchent les éléments de pénétrer entre les cellules (membranes très proches)
- intermédiaires
- desmosomes et hémisomes
58
Biosynthèse des membranes
- renouvellement
| - étapes
59
renouvellement de la membrane
- continu
- apport continuel de nutriments
- perte par endocytose ou phagocytose
- taille de la cellule stable
- équilibre synthèse-dégradation (homéostasie)
- rapide
- demi-vie des constituants :
* 2 à 3j protéines
* 3 à 5j lipides
60
étapes de la biosynthèse des membranes
1) 2 compartiments pour synthèse :
- cytosol
- système endomembranaire
2) Adressage :
- flux membranaire vectoriel permanent
- orientation de façon préférentielle vers le pôle/face latéral
61
Caractéristiques toxine cholérique
- protéine avec 6 SU (1A et 5B)
- SU B se fixent sur les glycolipides membranaires des cellules épithéliales intestinales
- induit changement de conformation avec présentation de la SU A à la surface de la cellule
62
Étapes de l'action de la toxine cholérique
- pénétration de la SU A
- inhibition de la GTPase bloquant l'adenylate cyclase en mode "on"
- augmentation des niveaux d'AMPc intracellulaires provoquant une sécrétion massive d'eau et d'électrolytes dans la lumière intestinale
