Que sont les compartiments des mitochondries
La membrane externe, l’espace inter-membranaire, la membrane interne et la matrice
Est ce que les mitochondries synthétisent la majorité des protéines dans leur matrice
Non, juste un petit nombre de protéines sont synthétisées par les mitochondries et 99% de leur protéines sont produits par les ribosomes cytosoliques
Que sont les système expérimental pour étudier l’importation des protéines dans la mitochondrie
Reconstitution de systèmes de transport acellulaires: purification des mitochondries, synthèse du précurseur radioactif, incubation in vitro et vérification de l’importation
Changement des conditions d’incubation
Modifications du peptide signal
Essai sur cellules lycées: proteinase K ou trypsin protection assay
Comment on fait la localisation du protéine mitochondriale par la technique de protection à la proteinase K
1) On fait un traitement protéinases K pour protéger les protéines de l’espace intermembranaires, de la membrane interne et de la matrice de la digestion
2) On utilise un milieu hypotonique ou un traitement par digitonine pour causer une rupture de la membrane externe
3) On réutilise traitement K pour protégée les protéines de la matrice
4) On fait une lyse de la membrane interne en utilisant un détergent
5) traitement K toutes les protéines sont digérées
Comment on fait la localisation du protéine mitochondriale par la technique de microscopie confocale colocalisation avec marqueur de la mitochondrie
Reconstitution 3D de mitochondries et de la protéine MAVS intégrée dans la membrane externe de la mitochondrie dans les cellules épithéliales respiratoires
Qu’est ce les protéines traversent l’ors d’importation dans la mitochondrie
Ils traversent à la fois les membranes interne et externe de façon transitoire durant l’importation
C’est quoi le complexe TOM
C’est le complexe translocateur général de la membrane externe de la mitochondrie indépendamment de la destination finale
Que fait le sous-unité TOM40
Ils forment un canal aqueux (GIP)
Que font les sous-unités TOM20 et TOM70
Ils sont les récepteurs primaires des séquences signal: TOM70 reconnait les séquences internes et TOM20 reconnait les présequences
Que font TOM22 et TOM5
Ils permettent le passage des protéines de TOM20/TOM70 vers le canal TOM40
Que font les affinités croissantes de TOM20/TOM22/TOM5/TOM40
Il produit un mouvement vers l’intérieur
Que montre l’analyse électrostatique de surface du complexe TOM
Il montre que la surface interne de Tom40 est principalement de potentiel négatif
C’est quoi la structure de la présequence
C’est entre 15 et 55 aa non conservée dans la séquence primaire qui forme une hélice a qui à des aa chargés positivement d’un coté et des aa hydrophobes de l’autre
Qu’est ce qui arrive une fois la présequence dans la matrice
Le signal est supprimé par des peptidases mitochondriales, puis il se retrouve dans les protéines de la matrice, mais également dans les protéines de la membrane interne avec un domaine transmembranaire et protéines de l’espace intermembranaire
Que fait le complexe translocase TRIM23
Il catalyse la translocation dans la matrice et la membrane interne des mitochondries
Comment est transféré une protéine du complexe TOM au complexe TIM23
En présence de potentiel de membrane et d’une préséquence le canal de translocation est en conformation ouverte, puis la préprotéine est transférée au récepteur TIM23 et insérée dans le canal qui est facilité par la liaison de TIM21 à TIM22
Qu’est ce qui arrive entre les complexe TOM et Tim quand il n’y a pas de potentiel
La préprotéine reste bloqué à ce stade de l’importation : interaction présequence avec TOM22 et interaction partie mature avec TIM50
C’est quoi le complexe PAM
C’est l’élément moteur de la translocation
C’est quoi l’élément central du PAM
C’est la protéine Hsp70 mitochondriale (mtHsp70-ATP) qui est attachée au canal via la protéine TIM44
Que fait mtHsp70-ATP
Elle lie faiblement la préprotéine, puis cette liaison induit l’hydrolyse d’ATP en ADP+Pi
Que font Pam 16/17/18
Ils régulent l’activité ATPase de mtHsp70
Que fait Mge1 du complexe Pam
Il est impliqué dans l’échange de nucléotide sur mtHsp70
Quelle type de complexe est TIM23
IL est un complexe qui dépend du potentielle et non de l’ATP et qui est dynamique et non statique
Qu’est ce qui va bloquer le complexe TIM23
Les protéines qui sont dirigées dans la membrane interne qui contient une séquence hydrophobique en aval de la présequences
