Quelles sont les stratégies pour introduire de l’adn dans une cellule ?
Nombre de cellule qui prendront l’ADN: efficacité de transfection/transduction
Le niveau d’expression du gène:
copie/plusieurs copies
L’expression dans le temps:
qlq heures ou qlq jours
Quels facteurs déterminent comment on choisit la stratégie pour introduire l’ADN dans une cellule ?
Environnement cellulaire: cell en culture ou dans le cerveau
Type cellulaire: fibroblastes, neurones, astrocyte
But de l’expérience: expression transitoire ou à long terme
Comment l’ADN est-il introduit dans la méthode physique ?
Pénétration d’ADN à travers la membranaire cellulaire par l’utilisation d’une force physique
Comment l’ADN est-il introduit pendant l’electroporation ?
Application d’un champ électrique aux cellules qui induit la formation de pores au niveau de la mb cellulaire, permettant à l’ADN de rentrer
Comment l’ADN est-il introduit dans une cellule ?
L’ADN chargé - forme un macro-complexe avec un produit chimique chargé +
Le macro-complexe se fixe à la mb et subira une endocytose/fusion avec la membrane
Quelles cellules les adénovirus peuvent-elles infecter ?
Cellules en division et cellules post-mitotiques
De quoi ont besoin les adéno-associés pour se multiplier ?
D’un virus auxiliaire (helper)
Donc est + sécuritaire que les autres virus
