Protéines Cours 6A - Système du complément

Question 1

Quelle est la définition du complément?

Answer 1

Ensemble de protéines plasmatiques et membranaires et de récepteurs cellulaires qui assurent un lien entre l’immunité innée et l’immunité adaptative

• > 30 protéines
• Synthétisées par le foie et par les cellules impliquées dans la réponse inflammatoire

Question 2

****Quelles sont les 3 grandes voies d’activation du complément?

Answer 2

1. Voie classique
   
   • Complexes Ab-Ag
2. Voie des lectines
   
   • Présence de lectines à la surface des pathogènes
3. Voie alternative
   
   • Dépend seulement de la surface des pathogènes
   • Pas besoin d’Ab

Question 3

***Quelles sont les 3 conséquences de l’activation du complément?

Answer 3

1. Recrutement de cellules inflammatoires
2. Opsonisation des pathogènes
   
   • Favorise phagocytose (pathogène recouvert de molécules du complément
3. Lyse des agents infectieux

Question 4

Vrai ou faux : La voie classique du complément est activée par les complexes Ag-Ab et la CRP liée à la surface des bactéries

Answer 4

VRAI

Question 5

***Quels Ig activent le complément de façon préférentielle?

Answer 5

Les IgM

**Les IgG sont également capables, mais ça en prend 2!

Question 6

Quelles sont les premières étapes de l’activation du complément par la voie classique?

Answer 6

• C1q lie un IgM ou un IgG (via région Fc)
  
  • Prend 2 IgG
• Autoactivation de C1r
• Clivage et activation de C1s par C1r
• C1s activé clive C4
  
  • C4a : médiateur de l’inflammation (circulation)
  • C4b : Liaison au pathogène (opsonisation)
• C4b lie C2
• C2 est clivé par C1s
  
  • C2a : S’associe avec C4b à la surface du pathogène
  • C2b : va en circulation
• C2a + C4b = C3 convertase

Question 7

Dans quel contexte le complément est-il activé par la voie des lectines?

Answer 7

• Activation par la liaison de lectines sur des mannoses à la surface d’organismes étrangés
  
  • Indépendant des Ab
• Principalement des levures

Question 8

Quelles sont les premières étapes de l’activation du complément par la voie des lectines?

Answer 8

• Lectines (MBL) complexé avec MASP-1 et MASP-2 lie un mannose à la surface du pathogène
• C4 est clivé
  
  • C4a : médiateur de l’inflammation (circulation)
  • C4b : Lie la surface du pathogène
• C2 est clivé
  
  • C2a : s’associe à C4b à la surface du pathogène
  • C2b : en circulation
• C4b + C2a = C3 convertase

Question 9

Quel est le contexte d’activation du complément par la voie alternative?

Answer 9

• Activation spontanée de C3 par des protéines à la surface des pathogènes
• Ne requiert pas la formation de complexes Ag-Ab
• N’importe quel matériau in vivo peut activer le complément (Ex : prothèse)

Question 10

Quelles sont les premières étapes de l’activation du complément par la voie alternative?

Answer 10

• Hydrolyse spontannée de C3
  
  • C3a : circulation
  • C3b : Se lie à la surface du pathogène
• Facteur B se lie à C3b
• Facteur D clive Facteur B lorsque lié à C3b
  
  • Facteur Ba : circulation
  • Facteur Bb : reste lié à C3b
• C3b + facteur Bb = C3 convertase
• C3b + C3b + facteur Bb = C5 convertase

Question 11

Quel est le rôle de la C3 convertase formée par les 3 voies d’activation du complément?

Answer 11

• C3 convertase clive le C3 :
  
  • C3a : Anaphylatoxine, favorise inflamamtion
  • C3b : Participe à la cascade d’activation
• Fixation de C3b à la surface du pathogène
  
  • mène à l’opsonisation
  • génère l’activité de la C5 convertase
    
    • ​C4b-C2a-C3b
    • C3b-Bb-C3b
• C5 convertase clive C5
  
  • C5a : Anaphylatoxine la + importante
  • C5b : Se lie à la surface du pathogène
    
    • Noyau pour le complexe d’attaque membranaire

Question 12

Quelle est l’étape ultime de l’activation du complément (indépendamment de la voie d’activation)?

Answer 12

Formation du complexe d’attaque membranaire

Question 13

Quelles sont les étapes de la formation du complexe d’attaque membranaire (MAC)?

Answer 13

• C5b + C6 + C7 + C8 + C9
  
  • Plusieurs molécules C9 pour former le pore membranaire

Question 14

Nommer des rôles biologiques du complément

Answer 14

• Opsonisation
  
  • Macrophage reconnait C3b à la surface
• Production d’anaphylatoxines
  
  • Médiateurs de l’inflammation : C3a, C4a, C5a
• Lyse cellulaire
  
  • Pore : C5b-C6-C7-C8-C9
• Amélioration de la réponse des cellules B
  
  • Améliore production d’Ab (C3d)
• Contrôle de la formation et clairance des complexes immuns
  
  • Macro complexe Ag-Ab-C3b
  • Mécanisme principal de clairance complexe immun
• Clairance des cellules nécrosées ou en apoptose
  
  • Cibles d’opsonisation (Cb3)
• Protection anti-virale
  
  • Opsonisation de particules virales
  • Activation voie classique et lectines

Question 15

***Nommer des régulateurs de l’activation du complément

Answer 15

• C4BP
• Facteur H
• C1-INH
• Facteur I
• DAF

Question 16

Quel est le rôle principal des régulateurs de l’activation du complément?

Answer 16

Empêcher l’action du complément contre les cellules du soi

• Les régulateurs sont présents à la surface des cellules du soi

Question 17

Quels sont les 3 types de mécanismes des molécules régulatrices de l’activation du complément?

Answer 17

• Dissociation des convertases
  
  • C1-INH
  • C4BP
  • Facteur H
  • DAF
• Dégradation des facteurs à la surface cellulaire
  
  • Facteur I
• Agissent comme cofacteur de la dissociation et de la dégradation
  
  • C4BP
  • Facteur H

Question 18

Vrai ou faux : Les régulateurs de l’activation du complément sont spécifiques à certaines voies

Answer 18

VRAI

​

Question 19

**** Quelle est la spécificité de chacun des régulateurs de l’activation du complément?

Answer 19

• ​C4BP : Lectine + classique
  
  • Dissocie C4b-C2a
• C1-INH : Classique
  
  • Dissocie C1qrs
• Facteur H : Alternative
  
  • Dissocie C3b et Bb
• Facteur I : Toutes
  
  • Dégrade C4b et C3b
• DAF : Toutes
  
  • Dissocie C3b et Bb
  • Dissocie C4b-C2a
• CD59 : Toutes
  
  • Empêche formation du MAC (C5 à C9)

Question 20

Quelles sont les différentes méthodes d’analyse disponibles pour l’investigation du complément?

Answer 20

• Méthodes fonctionnelles pour l’activité totale
• Méthodes immunologiques pour doser un élément en particulier
• Activité spécifique d’un facteur
• Analyse des produits d’activation
• Dosage des autoanticorps anti-complément
• Expression des marqueurs de surface et identification de la déposition du complément à la surface cellulaire
• Séquençage génétique
• Monitoring de l’éculizumab

Question 21

*** Qu’est-ce que le test CH50?

Answer 21

Investigation du complément

• Essai hémolytique
• Activation totale de la voie classique
  
  • ​Mesure de l’activité de C1 à C9
• Faire différentes dilutions du sérum pour obtenir 50% de lyse
  
  • Lyse de RBC de mouton sensibilisé
  • Liposomes
• Détermine quelle quantité de sérum est nécessaire pour obtenir lyse

Question 22

***Qu’est-ce que le test AH50?

Answer 22

Investigation du complément

• Essais hémolytique
• Activation totale de la voie alternative
  
  • EGTA pour inactiver voie classique
• Détermine la dilution du sérum qui donne 50% d’hémolyse

Question 23

Comment l’activité d’un élément d’une voie d’activation du complément peut-elle être évaluée (méthode analytique)?

Answer 23

• Reconstruction de l’activité hémolytique d’un sérum de patient
• 2 approches
  
  1. Sérum patient + sérum déficient en 1 prt + CH50
  2. Sérum patient + prt du complément + CH50

Question 24

Quelles sont les considérations analytiques pour le dosage d’éléments relatif au complément?

Answer 24

• Complément très sensible à l’activation in vitro
  
  • Chaleur
  • Exposition prolongée à T° ambiante
  • Complexes immuns ou agglutinines froides
• Sérum frais et réfrigéré < 48h ou congelé à -70°C

Question 25

Quels auto-anticorps anti-complément est-il possible de doser?

Answer 25

* Ab Anti-C1-INH * C3NeF * C4NeF * Ab anti-C1q

Question 26

Comment est-il possible de doser les complexes immuns circulants (CIC)?

Answer 26

* Méthode basée sur la reconnaissance de C1q ou de C3

Question 27

Quel est l'impact de l'augmentation de l'activation du complément?

Answer 27

Inflammation non-spécifique

Question 28

Nommer des pathologies associées au complément

Answer 28

* Infectieuses * Bactériennes * virales * Maladies rhumatologiques * Maladies rénales * Maladies hématologiques

Question 29

\*\*\*Nommer 2 maladies rénales issues du désordre du complément

Answer 29

* Glomérulonéphrite membrano-proliférative (GNMP) * C3 bas * Ab anti-C3 convertase * Syndrome urémique hémolytique (HUS) * Facteur H déficient

Question 30

\*\*\*Qu'est-ce que la glomérulonéphrite membrano-proliférative?

Answer 30

_Caractéristiques_ : * Dépôts sous-endothéliaux dans les parois capillaires * Prolifération cellulaire mésangliale * Prrésence en immunofluorescence de dépôts granuleux le long des parois capillaires et dans le mésangium _Classification_ : * Histologique : type I-II-III * Selon métanisme physiopatho * Associée à des complexes immuns (qui active complément) * Associée à des anomalies d'activation du complément

Question 31

\*\*\*Quelles sont les différences entre les 3 types de glomérulonéphrite membranoproliférative?

Answer 31

**_Type I_** : * Complexes immuns circulants et dépôts * Augmentation de l'activation de la voie classique * Test labo : * **↓ C3, C4, C2, C1q, B** * **CIC +** * **C4NeF (Nfc)** + * **CH50 ↓ et AH50 N** **_Type II_** : * Pas de complexes immuns circulants * Activation anormale de la voie alternative * Tests de labo : * **CIC -** * **C3NeF (NFa) +** * **↓ C3 et H** * **AH50 ↓ et CH50 N** **_Type III_** : * Activation de la voie alternative et du MAC * Tests de labo : * **NFt +** * **↓ C3, C5 et MAC (C6-7-8-9)** * **AH50 ↓ et CH50 ↓**

Question 32

\*\*\* Proposer un algorithme différentiel pour la glomérulonéphrite membranoproliférative (GNMP)

Answer 32

**_Suspicion de GNMP_** : Présence de dépôts granuleux le long des parois vasculaires 1. Doser **AH50 et CH50** * CH50 ↓, AH50 N : Voie classique affectée * AH50 ↓, CH50 N : Voie alterne affectée * AH50 ↓, CH50 ↓ : Voie commune affectée 2. Dans voir classique doser **C4NeF ou CIC** * C4NeF ↑ / CIC + : Type I 3. Dans voie alterne doser **Facteur H** * Facteur H ↓ : Type II 4. Dans voie commune doser **C5 ou MAC (C6-7-8 ou 9)** * C5 ou MAC (C6-7-8 ou 9) ↓ : Type III \*\* Combiné avec imagerie et histologie pour visualiser les dépôts

Question 33

\*\*\*\*Qu'est-ce que le syndrome urémique hémolytique (HUS)?

Answer 33

_Triade_ : * Anémie hémolytique microangiopathique * Thrombocytopénie * Insuffisance rénale aiguë

Question 34

\*\*\*\* Quels sont les 2 types de syndrome urémique hémolytique?

Answer 34

1. "**Régulier**" : Maladie de hamburger * Avec diarrhée * Causé par E. coli 2. **Atypique** * Sans diarrhée * Activation incontrôlée du complément * Mutation régulateur du complément (facteur H, I ou MCP) * Sur activation du complément mène à des dommages aux tissus

Question 35

\*\*\*\*Proposer un algorithme différentiel pour différencier les 2 types de syndrome urémique hémolytique et pour caractériser le HUS atypique

Answer 35

1. Recherche de toxine produite par E. coli * Présente : HUS régulier suspecté * Absente : Investigation HUS atypique 2. Doser C3 * Normal : HUS atypique peu probable * ↓ : Continuer 3. Doser facteur H * ↓ : Mutation facteur H * Normal : Doser facteur I * ↓ : Mutation facteur I * Normal : Doser MCP * ↓ : Mutation MCP ## Footnote ***\*\*\*Investigation des 3 types de mutation les plus fréquentes. Tests génétiques***

Question 36

\*\*\*Nommer des maladies hématologiques causées par un débalancement du complément

Answer 36

* Angio-oedème * Hémoglobinurie paroxystique nocturne

Question 37

Qu'est-ce que l'angio-oedème?

Answer 37

* Oedème des tissus mous * Oedème sous-cutané et sous-muqueux * Enflure près de la bouche * Mort par oedème

Question 38

\*\*\*\*Quels sont les 3 types d'angio-oedème?

Answer 38

* Type I : héréditaire * **Concentration** en **C1-INH ↓** * Type II : Héréditaire * **Activité** de **C1-INH ↓** * Type acquis : * **Ab anti-C1-INH**

Question 39

\*\*\*\*Quels marqueurs du complément devrait-on doser lors de l'investigation de la classification de l'angio-oedème ?

Answer 39

* CH50, C4, C1q et C2 bas * C3 normal * Dx différentiel : * C1-INH (Ag vs activité) * Ab anti-Ci-INH

Question 40

\*\*\*\*Proposer un algorithme différentiel pour caractériser le type d'angio-oedème

Answer 40

1. Doser CH50 * ↓ pendant la crise 2. Doser C3 * Normal 3. Doser C4, C1q et C2 * Tous abaissés 4. Doser C1-INH (concentration) * ↓ : **Type I** * Normal : doser activité * ↓ : **Type 2** * Normal : Doser Ab anti C1-INH * ↑ : **type acquis**

Question 41

Qu'est-ce que l'hémoglobinurie paroxystique nocturne?

Answer 41

* Poussées nocturnes d'hémolyse et d'hémoglobinurie par activation du complément * Causé par mutation du gène GPI-A * GPI : glycosyl phosphatidyl inositol * Protéine d'ancrage membranaire pour les régulateurs (CD59 et DAF) de la cascade du complément * Régultation moins efficace car non ancré à la membrane * CD59 : Prévient formation complexe membranaire * DAF : * Déplace Bb de C3b (voie alternative) * Déplace C2a de C4b (lectine et classique) ## Footnote ***\*\*Atteint toutes les voies du complément!***

Question 42

\*\*\*Proposer des tests à faire pour l'investigation de l'hémoglobinurie paroxystique nocturne

Answer 42

**_Cytométrie de flux :_** * CD16, CD14, DAF et CD59 (dépendants du GPI) **_FLAER :_** * Fluorescently labelled Aerolysin * Prt recombinante qui lie spécifiquement et avec beaucoup d'affinité l'ancre GPI * Signal ↓ = abscence de GPI

Question 43

\*\*\*Quelle est l'utilité clinique de l'éculizumab?

Answer 43

* Anticorps monoclonal anti-C5 bloquant la voie terminale d'activation du complément * Principalement utilisé pour traiter les maladies liées à une suractivation de la voie alterne du complément, comme l'hémoglobinurie paroxystique nocturne, les glomérulonéphrites de type membrano-prolifératives et le syndrome hémolytique urémique atypique

Question 44

\*\*\*\*Proposer un algorithme différentiel pour distinguer l'altération de la voie classique, alterne et lectine (ARUP)

Answer 44

Doser CH50, AH50, C3 et C4 **_Voie classique :_** * CH50 ↓ * AH50 **N** * C3 N-↓ * C4 ↓ **_Voie lectine_** : * CH50 ↓ * AH50 **N** * C3 ↓ * C4 ↓ **_Voie alterne_** : * CH50 **N** * AH50 ↓ * C3 ↓ * C4 N **_Distinction entre mutation génétique et consommation du complément :_** Doser C2, C4, C1 * Si un seul de diminué : mutation génétique * Si plusieurs de diminués : Consommation du complément **_Distinction entre activation de la voie initiale ou terminale du complément :_** AH50 et CH50 * Si AH50 ET CH50 ↓ : Consommation du complément dans la portion terminale