Temps pour la division et réplication
division prends 16h, donc 10h pour la réplication
approximation du nb de cellules dans le corps
50-75 milliards
millions de nouvelles cellules tous les jours, tous ont même code génétique
Caractéristiques de la réplication (4)
Ce que nécessite réplication
dNTP (desoxyribonucléotides triphosphates) C,T,G,A
jonction amorce:matrice
ADN polymérase
Pourquoi est-ce que la synthèse du brin se fait de 5’ vers 3’
l’extrémité 3’ (-OH) est un nucléophile utilisé pour l’attaque du phosphate alpha de la bases pour la liaison de celle-ci
Appariement correct des bases permet quoi
l’attaque du -OH se fait seulement si les bases sont appariées, donc il n’y aura pas de liaison
Structure de l’ADN polymérase
Main
paume: ions métallique et exonucléase
doigts: induisent rotation
pouce: garde le tout ensemble
Rôles des ions métallique de la paume de l’ADN polymérase
modifient environnement chimique de 3’OH et du dNTP
réduit 3’OH et 3’O- pour l’attaque
autres ions stabilisent les 2 autres phosphates
Rôle de l’exonucléase dans la paume de l’ADN polymérase
mésappariements ralentissent catalyse et diminué affinité de l’ADN pol pour la jonction amorce:matrice qui va sortir de son site actif
cela va permettre à l’exonucléase d’enlever l’ADN mésapparié
Rôle doigts ADN polymérase
lors de l’appariement correct les doigts se referment sur le dNTP pour le rapprocher des ions et augmenter la vitesse de catalyse
doigts induisent une rotation de 90 degré entre la 1ere et la 2ieme base de la matrice
pour empêcher tout appariement d’un dNTP avec la 2ieme base
Rôle du pouce de l’ADN polymérase
n’aide pas à la catalyse
maintien amorce et site actif de la paume en position optimale
maintien association forte entre ADN polymérase et son substrat
Fonctionnement ADN polymérase
Normalement, les enzymes se détachent après la rxn, pourquoi est-ce que l’ADN polymérase ne se détache pas?
elle est processives, car l’étape limitante de la rxn est la liaison de la polymérase à sa jonction amorce:matrice qui prends 1s alors que l’ajout d’un nucléotide prend 1ms
Fourche de réplication
pour que les 2 brins soient répliqués simultanément, besoin d’une fourche
endroit où ADN passe de 1 ADN bicaténaire à 2 ADN bicaténaire
Fragments d’Okazaki
ADN néosynthétisé à partir de nombreuses amorces installée par la primase sur le brin discontinu 100-2000 nt
Primase
ARN polymérase consacrée à la fabrication d’amorces courtes sur la matrice monocaténaire 5-10 nt
amorces doivent être retiré après, car ARN
Élimination des amorces ARN
RNase H (reconnait ARN hybridé)
dégrade ARN appariés à ADN, enlève tout sauf dernier ribonucléotide (exonucléase 5’ enlève dernier)
ADN polymérase remplit brèche
Césure réparée par ADN ligase
Hélicase
hexamère sous forme d’anneau
processive, 2 polarité existe (5, vers 3’ ou 3’ vers 5’)
ouvre double brin
utilise atp
SSB
protéines liant ADN(simple brin) pour stabiliser en empêchant le réappariement, la dégradation et la formation de boucle
liaison coopérative: liaison d’une SSB facilite liaison d’une autre SSB
Quel problème peut amener l’hélicase et comment les régler6
amène des surenroulements positifs
topoisomérase coupent ADN et font passer les brins dans la coupure pour qu’ils deviennent des surenroulements neutre
Comment différencier ADN polymérase des procaryote des eucaryotes
procaryotes chiffres romain
eucaryote lette grec
ADN polymérase qui fait la synthèse du brin discontinue de l’ADN
ADN polymérase qui fait la synthèse du brin continue de l’ADN
ADN polymérase qui fait la synthèse des amorces pendant la réplication de l’ADN