Typische Endosporen Bildner?
Auslösung der Sporenbildung?
Allgemeine Eigenschaften von Sporen?
Gattung Bacillus (viele Bodenbakterien, auch B. thuringiensis (insektenpathogen), B. anthracis (Milzbrand))
Gattung Clostridium (saccharolytische, peptolytische; zu letzteren zählen die Krankheitserreger C. histolyticum, C. tetani, C. botulinum)
Auslösung: Nährstofflimitation (NUR!, nicht allgemein Stress)
Allgemeine Eigenschaften: geringer Wassergehalt, Hitzeresistenz, chemische Resistenz, Strahlenresistenz
Zyklus der Sporenbildung
Ca-Dipicolinat/ Dipicolinsäure
- eine Substanz, die während der Sporulation (Sporenbildung) von Mikroorganismen gebildet wird. Sie kommt nur im Kern (Sporenprotoplasten) von Endosporen (5–15 % des Trockengewichts) vor, ist jedoch nicht in vegetativen Zellen enthalten.
Sterilisationsverfahren
Physikalisch
- Feuchte Hitze (i.d.R. 20 min bei 1210C) → Autoklavieren!
- Trockene Hitze (5 h bei 180 0C)
- Bestrahlung mit ɣ-Strahlen
- Filtrieren (durch Membranfilter mit Porengrößen von 0,2 μm)
Chemisch
- z.B. Begasung mit Formaldehyd, Ethylenoxid, Chlorgas, Ozon
Verfahren zu Teilentkeimung im Labor und in der Nahrungsmittelindustrie
Labor
- Bestrahlung mit UV-Licht
- Behandlung mit Desinfektionsmitteln
Nahrungsmittelindustrie
- Pasteurisieren (Erhitzen, 20 s, 130 °C)
- Zuckern (Wasserentzug)
- Salzen, Pökeln (NaNO2)
- Räuchern (Wasserentzug, bakterizide Substanzen im Rauch)
- Säuern/ Zusatz Säure produzierender Bakterien
Differenzierung von Mikroorganismen nach ihren Stoffwechseleigenschaften
- Produktion fluoreszierender Fe3+-Siderophore (Pyoverdine)
- Wachstum auf Benzoat
- Art der Ringspaltung bei der Verwertung von Benzoat
- Oxidase-Test
- Gram-Test
Siderophore, Funktion und Typen
Pyoverdine
- eine Stoffgruppe von rund 200 eisenbindenden niedermolekularen Verbindungen und Oligopeptiden, die von aeroben Bakterien, Pilzen und Pflanzenwurzeln gebildet und in das umgebende Medium ausgeschieden werden
- Typen: Catechol-, Hydroxamat-, Carboxylat-Typ
- Pyoverdine: fluoreszierende Siderophore, die von den Stämmen Pseudomonadenarten produziert wird
⇒ Wachstum auf einer King-B-Platte und fluoreszierend unter UV-Licht: Psuedomonas putida wurde so differenziert
Wachstum auf Benzoat
- nicht alle Bakterien sind dazu fähig aromatische Verbindungen zu spalten
⇒ Differenzierung anhand des Wachstums: P. putida und A. vinelandii wachsen auf Benzoat
Art der Ringspaltung bei der Verwertung von Benzoat
Oxidase-Test
Test auf Vorhandensein von c-Typ Cytochromen (Cyt bc1-Komplex, lösliches Cytochrom c und Cytochrom c-Oxidase in der Atmungskette
“Standard”-Atmungskette
NADH-Dehydrogenase → Chinone → bc1-Komplex → Cyt c → Cyt c-Oxidase (O2 → H2O)
Enterobakterien
NADH-Dehydrogenase → Chinone → Chinol-Oxidasen (O2 oder andere e- -Akzeptoren)
Reaktion des Kovacs-Reagenz im Oxidase-Test
- Tetramethyl-p-phenylendiamin wird oxidiert, gibt ein Elektron ab und bildet Wurster-Blau
- TMPD wird nur von der Cytochrom-C-Oxidase oxidiert
⇒ Ansatz wird nicht blau, wenn keine Cytochrom C Oxidase: Bei E. coli fällt der Test negativ aus
