Apoptose

Question 1

importance physiologique de l’apoptose ?

Answer 1

• > modelage d’organes (morphogénèse)
• > élimination des structures inadéquates
• > ajustement du nombre de ç et contrôle de qualité

Question 2

défaut d’apoptose (peu) ?

Answer 2

• > cancers
• > maladies auto-immunes
• > infections virales persistantes

Question 3

excès d’apoptose (trop) ?

Answer 3

• > SIDA
• > maladies auto-immunes
• > maladies neurodégénératives (Parkinson, Alzheimer)
• > lésions ischémiques (AVC, infarctus)

Question 4

caractéristiques morpho et biochimiques ?

Answer 4

• > condensation cytoplasme et noyau(atrophie ç)
• > condensation chromatine et fragmentation ADN
• > interruption système d’ancrage
• > fragmentation RE/Golgi
• > désorganisation cytosquelette
• > bourgeonnement de la MP = blebbing, chou-fleur
• > fragmentation des corps apoptotiques = blebs
• > élimination des blebs après reconnaissance et phagocytose

Question 5

modifs membranaires ?

Answer 5

-> intégrité membrane JAMAIS altérée
-> externalisation de la phosphatidyl-sérine= pancarte “eat me”
-> détectée par marquage à l’annexine V (fluo verte)
-> détection par cytométrie de flux :
-marquage à l’annexine V (vert) associé à iodure de
propodium (rouge, intercalant ADN, que pour ç n’ayant
plus d’intégrité mb=nécrose)

Question 6

modifs mitochondriales ?

Answer 6

-> dans ç viables : Bax localisation cytosolique
-> dans ç apoptotique : Bax devient membranaire (ME mito) + formation pores
=chute du potentiel mb + sortie du cytochrome C de l’EIM vers cytosol

Question 7

fragmentation de la chromatine ?

Answer 7

• > fragmentation régulière tous les 180 nt
• > CAD (DNase) = coupe liens interchromosomiques
• > inactivation PARP
• > migration sur gel d’agarose : profil en échelle/aspect en barreaux
• > ç normale = 1 bande

Question 8

marquage TUNEL ?

Answer 8

• > addition UTP couplé à 1 fluorochrome = fixation sur extrémités 3’OH libres
• > fluorescence est proportionnelle à ADN fragmenté

Question 9

nécrose ?

Answer 9

• > gonflement ç + organites
• > dégradation MP
• > libération contenu cytoplasmique
• > réaction inflammatoire
• > dégradation aléatoire ADN

Question 10

Autophagie ?

Answer 10

• > accumulation de vacuoles autophagie
• > augmentation de protéolyse
• > élimination organites
• > pas activation caspases

Question 11

nématode ?

Answer 11

• > ver de 1 mm de long, C.elegans
• > larve = 1090 ç
• > adulte = 959 ç (les autres meurent par apoptose)
• > modèle pour étude de l’apoptose, vieillissement, système nerveux

Question 12

décision ?

Answer 12

• > c.elegans : ced 9/egl-1

- > mammifères : bcl-2/bax

Question 13

activateurs ?

Answer 13

• > c.elegans : ced-4

- > mammifères : apaf-1

Question 14

exécuteurs ?

Answer 14

• > c.elegans : ced-3

- > mammifères : caspases

Question 15

famille des caspases ?

Answer 15

• > 14 membres
• > Cystéine protéase clivant des substrats protéiques au nv d’un Asp
• > initiatrices : 8,9
• > effectrices/executrices : 3, 6, 7

Question 16

activation des caspases ?

Answer 16

• > forme inactive présente dans toutes les ç

- > activation par protéolyse : 2 petites s.u (P10) et 2 grandes s.u (P20) = tétramère actif

Question 17

cibles caspases exécutrices ?

Answer 17

• > ICAD
• > externalisation Ps
• > kinase ROCK=blebbing
• > lamines, actine (prot structure)
• > arrêt traduction …

Question 18

phases réversibles et modulables ?

Answer 18

• > phase d’initiation

- > phase de décision

Question 19

phase irréversible ?

Answer 19

-> phase de dégradation/exécution

Question 20

Anti-apoptotique ?

Answer 20

Bcl-2 (multidomaines)

Question 21

Pro-apoptotique ?

Answer 21

• > mutidomaines : Bax

- > seulement BH3 : Bid, Bad

Question 22

Voie intrinsèque ?

Answer 22

• > voie de stress, mitochondriale
• > si Bcl-2 + nbreuses : Bax ne se fixe pas = survie
• > si Bax + nrbeux = apoptose

Question 23

Voie extrinsèque ?

Answer 23

• > Rc de mort
• > famille rc de mort : Fas, TNFR, DR
• > famille signaux de mort : FasL, Tumor Necrosis Factor, TRAIL
• > DD : domaine de mort conservé de 80 AA

Question 24

Voie perforine/granzyme ?

Answer 24

-> voie ç tueuses : NK, LT cytotoxiques , CTL
1- augmentation calcium intraç
2-exocytose
3-libération perforine dans espace inter-ç
4-insertion dans mb ç cible
5-polymérisation monomères perforine
6-formation pores cylindriques
-> une fois dans le cytoplasme, granzymes activent des voies caspases dép (caspase-3, procaspase-8, Bid, Bax..) et caspases indép (ICAD, Lamines B)