Clonagem Flashcards

(27 cards)

1
Q

clonagem

A

produção de multiplas copias geneticamente identicas

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Q

para que pode ser usada a clonagem?

A

armazenar DNA ou para expressão

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3
Q

vetor de clonagem

A

transportam o gene que queremos clonar

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4
Q

tipos de vetores de clonagem

A

plasmídeos, fagos, cosmídeos, BAC, YAC, MAC

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Q

plasmídeo

A

elementos de DNA circular não cromossómicos. Contêm um gene que lhes confere resistência a um antibiótico.

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6
Q

fago

A

Têm cadeia dupla e DNA linear, o DNA incluído na cabeça do fago é transfetado para a E.coli

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7
Q

cosmídeos

A

combinação das propriedades dos fagos e dos plasmídeos

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8
Q

BAC

A

vetor artificial para bactérias

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9
Q

YAC

A

vetor artificial para leveduras

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10
Q

MAC

A

vetor artificial para eucariotas

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11
Q

plasmídeos conjugativos

A

contêm genes tra, que sintetizam o pilus sexual das bactérias

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12
Q

plasmídeos mobilizáveis

A

contêm genes mob e são capazes de transferir cópias de si próprio para outros

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13
Q

plasmídeos autotransmissíveis

A

têm genes tra e mob

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14
Q

plasmídeos integrativos

A

entram dentro da célula e integram-se no genoma na forma de epissoma

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15
Q

plasmídeos não integrativos

A

ficam no citoplasma

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16
Q

proteínas heterologas

A

expressas num organismo atraves de genes de outro organismo

17
Q

zona de clonagem

A

local no vetor onde se adiciona o material genético

18
Q

para que servem os marcadores

A

para avaliar se o DNA é recombinante e se a célula incorporou o vetor

19
Q

gene reporter

A

reporta se a transformação aconteceu

20
Q

como avaliamos se o vetor é recombinante

A

testamos a presença do lac z , se a célula tiver lac z produz uma cor azul, se houver DNA recombinante fica branco

21
Q

como avaliamos se a célula incorporou o vetor

A

plaqueamos as células num meio seletivo que contém antibiótico, apenas as bactérias que têm o plasmídeo sobrevivem

22
Q

células competentes

A

são células permeáveis a DNA, ou seja capazes de receber DNA recombinante.

23
Q

como é que podemos tornar as células competentes?

A

Tratar com CaCl2 e choques elétricos.

24
Q

transformação

A

aquisição de DNA livre pelas células

25
conjugação
transferência de DNA entre duas células que estão em contacto físico entre si
26
plasmideo F
permite que as bactérias façam conjugação, têm gene tra que codifica o pilus, têm origem de replicação e genes mob.
27
transdução
tranferência de DNA mediada por um vírus