1
Q
3 grandes étapes
A
1)Lyse cellulaire
2)Purification
3)Précipitation de l’ADN
1
Q
Lyse cellulaire (2)
A
°Choc thermique ou billes de verres + phénol chloroforme (centrifugation)°Solution de lyse (solubilise membrane et dénature prots) + centrifugation
2
Q
Purification (3)
A
°Prendre phase aq
°Extraction phénol chloroforme avec centrifugation
°Prendre phase aq
3
Q
Précipitation ADN (3)
A
°Ajout NaCl et éthanol (éthanol favorise lien Na+ et PO4-, rend ADN moins soluble et moins hydrophile) + centrifugation
° Lavage éthanol (élimine petites mols) + centrifugation
°Sècher ADN + eau stérile
TP-Biochimie
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