microscope

Question 1

I. Microscopie optique (MO)

Answer 1

Permet l’observation des cellules fixées et colorées avec des grossissements
X 1500 à X 2000. Son pouvoir séparateur est de 0,1μm.

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Question 2

2. Autres types de MO

Answer 2

• Microscope en contraste de phase
  La cellule survit rarement à la coloration, surtout pour les techniques les plus complexes. C’est pourquoi le microscope à contraste de phase est employé vu que celui- ci permet d’observer des cellules vivantes et non colorées.
• Microscope à fluorescence
  Permet de détecter la fluorescence en utilisant une lumière UV.

Question 3

2. ME à balayage (MEB)

Answer 3

2. ME à balayage (MEB)
   Le faisceau d’électrons balaie l’échantillon de gros volume sans le traverser.
   Son pouvoir séparateur étant > 10 nm, il est utilisé pour l’observation de la surface

Question 4

1. ME à transmission (MET)

Answer 4

1. ME à transmission (MET)
   * Utilisant 100 kilovolts en général. Les électrons traversent l’échantillon dont l’épaisseur < 0,1μm.
   * Utilisant 1 million de volts c’est le MET à haut voltage permet d’observer des échantillons plus épais. Il révèle la forme tridimensionnelle des organites.

Question 5

1. Fixation

Answer 5

1. Fixation (éthanol, acide picrique : fixer les Ȼ en les tuants + conservant leur structure)
2. Déshydratation
3. Inclusion en utilisant la paraffine
4. Microtomie (coupe de 1µm à 10µm d’épaisseur)
5. Etalement sur une lame de verre
6. Coloration
7. Observation

Question 6

Pour le ME,

Answer 6

Pour le ME, il faut des coupes ultra fines de l’ordre de 30nm
1. Fixation (glutaraldéhyde)
2. Déshydratation
3. Inclusion en utilisant la résine
4. Ultra microtomie
5. Coloration à l’aide de métaux lourds
6. Observation