Intérêt ?
Les sucres sont très souvent impliqués dans des processus de reconnaissance moléculaire.
Type de puces à sucre ?
- Puce avec des sucres sur le support pour reconnaitre des protéines
- Puce avec des protéines sur le support qui vont reconnaitre des sucres
Glycane
Polymère composé de monosaccharides reliés entre eux par une liaison glycosidique
3 façon d’obtenir les sucres ?
- Synthèse chimique
- Synthèse enzymatique
- Récupération des sucres sur les glycoprotéines ou glycolipides par clivage avec de la glycosidase (caractérisation par spectrométrie de masse)
Immobilisation des sucres ?
On fait une dérivatisation permettant de mettre un groupement sur les sucres pour qu’ils se fixent sur la lame. On ajoute un groupement X fonctionnel.
- Les sucres sont immobilisé de manière covalente, via un groupement réactif, à la surface de la lame de verre qui a été fonctionnalisé. (Expl : surface NHS - Amine primaire lysine)
- Les sucres sont immobilisés non-covalemment via groupement permettant adsorption sur surface adsorbante.
(Expl : surface nitrocellulose)
Fonctionnement puce à sucre ?
On incube la puce avec une protéine marquée, un anticorps marqué ou une cellule marquée pour déterminer quel oligosaccharide se fixe à cette protéine, anticorps, cellule.
Détection ?
On peut utiliser la fluorescence qui reste une méthode de choix. Il y’a aussi la SPR et quasiment toutes les détections vu avec les protéines.
