Analytes Flashcards

Question

Digoxine

Answer 1

* Ion extracellulaire * VR : 135-145 mmol/L * _Méthode_: * ISE * Dosage sur les appareils à gaz sanguin * CV analytique le plus petit en biochimie clinique (0,7% idéalement; 1,25% = ça ne va pas bien!!)

Answer 2

* Ion intracellulaire * VR : 3,5 - 5 mmol/L

Answer 3

* Marqueur non spécifique : **Plusieurs isoformes** (Placenta \> intestin \> rein \> os \> foie) * Hépatique : protéine à la surface des canaux biliaires. Interprété avec GGT * _Utilité clinique_ : * Maladies osseuses, maladies hépato-biliaires, cancers * Éch : sérum ou plasma * Méthode enzymatique colorimétrique * Cofacteur : Mg2+ * VR varient en fonction de l'âge et du sexe * 40-120 U/L (adultes \> 18 ans)

Answer 4

_Indication_: * Suivi de la glycémie chez les patients diabétiques * Diagnostic du diabète * Glycémie à jeun \> 7 mmol/L * Glycémie aléatoire ou hyperglycémie provoquée : \> 11,1 mmol/L * Dépistage hypo/hyper glycémie * Mesure dans le sang, l'urine, le LCR _Méthodes de dosage_: **Méthode standardisée** * Hexokinase (enzymatique, Abs 340 nm) * Glucose oxydase (enzymatique colorimétrique, H2O2, composé coloré) * Spécifique au B-D-glucose * Glucose déshydrogénase (enzymatique, Abs 340 nm) _Limites_: * Sang total \< plasma/sérum (10-12%) * Glucose consommé par les cellules si le prélèvement n'est pas analysé rapidement * Tube gris (oxalate + NaF) bloque glycolyse, mais pas instantanné * Consommation du glucose : 5-7% à l'heure

Answer 5

_Indication_ : Diagnostic et suivi du diabète * Taux de HbA1c corrèle avec risques de complications du diabète _Méthodes de dosage_ : 2 approches * Séparation : chromatographie * Échangeuse de cations * Boronate (affinité) * Identification de la glycation comme un Ag : * Immunoessais (Ab spécifique au N-ter de HbA1c et à la glycation) * Enzymatique (clivage spécifique du réside glyqué en N-ter) _Limites_: * Contre-indiqué chez femme enceinte, les enfants et les patients souffrant de fibrose kystique * Prend en compte que le *turnover* des RBC est normal * Fausse augmentation : Durée de vie des RBC plus longue * Anémie déficit en fer * Anémie liée au déficit en Vit B12 ou folate * HyperTG sévère, hyperBili sévère * Empoisonnement au plomb * Ingestion chronique d’alcool, salicylates, opioïdes * Fausse diminution : Durée de vie des RBS plus courte, renouvellement RBC accéléré * Anémie hémolytique * Perte sanguine aiguë ou chronique * Grossesse 2e trimestre (\<90 jours RBC) * Insuffisance rénale (sous-estimation du taux de glucose) * Transfusion récente affecte taux HbA1c * Variant d'Hb fausse le résultat

Answer 6

_Indication_ : * Suivi du contrôle de la glycémie lorsque HbA1c est indépendant de la glycémie (hémolyse, transfusion) * Reflet de la glycémie des 2-3 dernières semaines (vs HbA1c 4-6 semaines) _Méthode de dosage_ : * Réduction du NBT en formazan : Mesure de l’Abs à 530nm. Changement Abs proportionnel à [fructosamine] * VR (individu sain) : 205-285 umol/L _Limites_ : * Irrecevable si [Albumine] \< 30 g/L : 80% de fructosamine = albumine glyquée * Interférence analytique acide ascorbique (faux négatif)

Answer 7

_Indication_ : * Pas vraiment indiqué, doser T4L * T4 totale (réserve de T4) * Dosage affecté par concentration de protéines de transport * 99% lié aux protéines : albumine, thyroxin-binding globulin (TBG), préalbumine * Plus grande affinité : TBG _Préanalytique_ : * Sérum/plasma * Stabilité : 7 jours 2-8°C _Analytique_ : * Immunoessais * Ne pas diluer * Interférences : * Phénytoïne * Ab hétérophiles

Answer 8

**Concentration n’est pas affectée par la concentration des protéines de liaison** _Indication_ : * Lorsque la TSH est anormale * Suivi d’une thérapie de remplacement * Utilisation lors d’une situation thyroïdienne en changement * Si Tx : pic 1-4h post-dose ; retour au niveau basal (9h) * Doser avant prise du Tx _Analytique_ : * Immunoessais * Ne pas diluer * Méthode de référence : ID-LC-MS/MS couplée à dialyse à l’équilibre

Answer 9

_TSH_ : * Stimuler la croissance de la glande thyroïde et la synthèse des hormones thyroïdiennes * Indispensable au maintien de la thyroïde _Indication_ : * Suspicion dysthyroïdie * Dosage de première intention _Préanalytique_ : * T1/2 = 1-2h * Sérum/plasma * Stable 5-7 jours à 2-8°C _Analytique_ : * Dosage immunologique * VR spécifiques

Answer 10

**Concentration affectée par les protéines de liaison** _Indication_ : * Lorsque TSH basse et T4 normale. Recherche de thyrotoxicose à T3 _Préanalytique_ : * Sérum/plasma * T1/2 = 1,5 jours _Analytique_ : * Dosage immunologique * 99% lié aux protéines : albumine et TBG * Fraction totale diminue si protéines de liaison diminuent, fraction libre est normale

Answer 11

_Indication_ : * Mesure de la T3T plutôt que la T3L _Analytique_ : * Sérum/plasma * Stabilité 8h T°p et 2 jrs 4°C * Dosage immunologique * Non affecté par les protéines de liaison

Answer 12

_Anti-TPO :_ * Anticorps anti-Thyroïdien * TPO = enzyme importante dans la production des hormones thyroïdiennes (iodation des tyrosines de la thyroglubuline et couplage des tyrosines mono-iodées pour produire T3 et T4 * Auto-Ab impliqué dans les désordres thyroïdiens. Ne sont pas exclusif à Hashimoto, mais sont souvent impliqués. Peuvent également être présent en cas de maladie de Graves-Basedow _Indication_ : * Graves ou Hashimoto * Thyroïdite de grossesse _Préanalytique_ : * Sérum/plasma * Centrifuger rapidement * Stabilité 3 jours 2-8°C _Analytique_ : * Dosage immunologique * Grande variabilité entre les différentes méthodes

Answer 13

_Thyroglobuline (Tg)_ * Marqueur d’intégrité de la thyroïde * Protéine dans les follicules de la thyroïde * Marqueur spécifique à la thyroïde * Normalement en faible concentration dans le plasma _Indication_ : * Suivi d’une thyroïdectomie complète (suite à un cancer) pour vérifier tissu résiduel * Donner TSH et doser Tg * Augmentation 5x = Normal, Augm 10x = Résiduel * Pour détecter récidive de cancer _Analytique_ : * Dosage immunologique * (!) Ab anti-Tg interfèrent (à doser en parallèle) * Nécessite utilisation de méthode ultra-sensible pour ID récidive

Answer 14

_Anti-Tg :_ * Normalement absents du sérum (très faible []) * Ab contre la thyroglobuline * Thyroglobuline = pool d’hormone thyroïdienne * Positifs chez 15-35% atteints de cancer * Interfèrent dans le dosage de Tg (fausse diminution) _Indication_ : * Vérifier dosage de Tg * Dosage de 2e intention pour hypothyroïdie Hashimoto (si anti-TPO négatifs) _Analytique_ : * Dosage immunologique

Answer 15

_Indication_: * Dosé pour le Dx des **désordres du cortex surrénalien** * Dosage ponctuel = peu d’intérêt diagnostic * Surtout dosé dans le cadre d’une **épreuve dynamique** (dexaméthasone) * La dexaméthasone n’interfère pas avec le dosage * Dosé lors de suivi d'un Tx inhibiteur stéroïdes _Préanalytique_: * Préciser l’**heure du prélèvement** * Rythme circadien : Élevé AM, bas la nuit * Sérum/plasma * Stabilité : 5 jours 2-8°C * Centrifuger \< 2h après le prélèvement _Analytique_ : * Dosage du **cortisol total (attention à CBG)** * Immunoessais * Cortisol déplacé des protéines de liaison par des agents de liaison aux protéines tels que l'ANS ou le salicylate, un pH bas ou un traitement thermique.

Answer 16

_Indication_ : * Cortisol salivaire est en équilibre avec le cortisol sanguin **(Cortisol libre)** * Normalement, le nadir du cortisol est à minuit * Chez les patients souffrant d’un syndrome de **Cushing**, la **variation diurne du cortisol est perdue** * **Dépistage** d’un syndrome de **Cushing** (92-100% sensibilité, 93-100% spécificité) * Test le plus sensible pour Dx Cushing * Plus efficace que le cortisol plasmatique puisqu’un prélèvement de salive est moins stressant qu’une prise de sang * Peut être indiqué pour doser le cortisol libre chez les patients qui ont une concentration de CBG altérée (grossesse, thérapie aux estrogènes) _Préanalytique_ : * Prélèvement à **minuit** * Conservation et transport du spécimen : **CONGELÉ** * Congélation pour dégrader les glycoprotéines salivaires (échantillon non visqueux !) * Préanalytique du prélèvement très contraignant (beaucoup de conditions à respecter) _Analytique_ : * Dosage du cortisol libre * Immunoessais ou LC-MS * Faux positif en IE (cortisone)

Answer 17

_Indication_ : * **Dépistage** d’un syndrome de **Cushing** (95-100% sensibilité, 98% spécificité) * Reflet de la concentration de cortisol libre dans le plasma _Préanalytique_ : * **Contre-indiqué** si patient avec **insuffisance rénale** * Contre-indiqué si l’élévation du cortisol est présumément légère (léger syndrome de Cushing). Dans ce cas, préférer le test de suppression à la dexaméthasone * Collecte d’urine 24h * **Pas de préservatif** (rejet si préservatif) * La patiente ne doit pas être menstruée * Stabilité : 7 jours 2-8°C * Transport du spécimen : Congelé _Analytique_ : * Dosage du cortisol libre * Immunoessais ou LC-MS * Dosage de la **créatinine en parallèle recommandé** pour vérifier que la collecte a été bien réalisée

Answer 18

_Indication_ : * Hyperprolactinémie (aménorrhée, dysfonction électile) * Étude de l'infertilité _Préanalytique_ : * Dosé 3-4h après le réveil _Analytique_ : * Attention à l'hyperprolactinémie (macroprolactine) * Immunoessais

Answer 19

_Transferrine:_ * Principale protéine de transport du fer ferrique (Fe 3+) * Lie 2 atomes de Fe 3+ de façon réversible * Affinité pour Fe 3+ : pH physiologique \> pH acide * Produite au foie * t1/2 : 8-10 jours * Augmentée lors de la grossesse * Augmentation utilisée pour identifier l'abus d'alcool _Indication_ : Peu d'indication du dosage direct de la transferrine * Dosage indirect dans le cas de l'évaluation de la capacité totale de fixation du fer (TIBC)

Answer 20

_Ferritine_ : * Molécule de stockage du fer * Indicateur principal des stock de fer * Le fer lie la ferritine seulement sous forme de fer ferreux (Fe2+) * Retrouvée dans toutes les cellules de l'organisme mais concentrée au foie. * Augmentation des stock de fer = augmentation de la ferritine (et inversement) * Augmente en présence d'inflammation aiguë * **Seul marqueur approprié pour la détection d'un déficit en fer chez une personne ASx** * [Ferritine] diminue bien avant concentration sérique en fer (détection précoce) _Indication_: * Surcharge enfer (Hémochromatose, surcharge aigue, transfusions multiples, défautsgénétiques) * Déficit en fer (Anémies, déficienced’absorptionoude transport...) * Insuffisance hépatique chronique (stéatohépatite, cirrhose, syndrome métabolique) * Suivi de l’efficacité des phlébotomies ou d’un traitement avec chélateurs de fer * Adult Still’s disease _Méthode de dosage_ : * Immunoessais de type sandwich * Existe plusieurs isoformes de ferritine : Ab ne détectent pas forcément les mêmes * VR varient selon âge, sexe et ethnie _Limites_ : * Interférences des immunoessais * Ab hétérophiles, biotine, effet crochet

Answer 21

* Mesure indirecte de l'acide lactique * Signe d'hypoxie tissulaire

Answer 22

* Indication clinique : * Désordres acido-basiques et électrolytiques * Régulation de l'eau par les reins (comparaison Osm urinaire et plasmatique) * Identification de substance exogène ayant un pouvoir osmolaire : Calcul du trou osmolaire * Méthodes: * Dépression du point de congélation * Dépression de la tension de vapeur * VR : 275-300 mOsmol/kg H2O

Answer 23

_Albumine_ : * Synthétisée au foie * Marqueur de chronicité de maladie hépatique * Diminué en cas d’inflammation et de grossesse * Protéine de transport de nombreux médicaments * Liaison du Ca ionisé * Acteur majeur dans la pression oncotique * T1/2 : 15-19 jours * Charge nette de -12 à pH neutre _Méthode_ : * Liaison à un colorant (vert ou pourbre de bromocrésol) et mesure de l'absorbance polychromatique * Pourpre de bromocrésol plus spécifique à l'albumine (valeurs plus basses que vert de bromocrésol) * VR : 35-50 g/L (adulte) * Plus faible chez les enfants

Answer 24

_Préalbumine_ : * Autre nom : **Transthyrétine** * Marqueur de l'état nutritionnel

Answer 25

* Séparation des protéines en fonction de leur charge sur gel d'agarose * Interprétation des intensités des bandes à l'aide d'un densitomètre (production d'un électrophorétogramme) * 5 composantes majeures : Albumine, Alpha-1 globulines, alpha-2 globulines, bêta globulines et gamma globulines * Moins sensible pour identifier les chaînes légères libres * Quantitatif mais NON qualitatif

Answer 26

* Désordre caractérisé par la production d’une **protéine monoclonale** : Prolifération d’un seul clone de plasmocyte qui produit une protéine M homogène (monoclonale) * Associé à un **processus clonal malin** ou potentiellement malin (versus gammapathie polyclonale) * **Initialement asymptomatiques** avec potentiel évolutif * Identifié à l’aide d’une **électrophorèse des protéines** sériques suivi d'une **immunofixation** * Prévalence augmente avec l’âge **_Gammapathies monoclonales_**: * Myélome multiple * Macroglobinémie de Waldenström * Plasmocytome solitaire * Myélome multiple indolent (smoldering multiple myeloma [SMM]) * MGUS * Leucémie à plasmocytes * Maladie à chaines lourdes * Amyloïdose à chaines légères (amyloïdose primaire)

Answer 27

_Liquide céphalorachidien_ : * Prélevé dans 4 tubes différents : * 2 vont en microbiologie : recherche d'infection * 1 va en hématologie : décompte cellulaire * 1 va en biochimie : * Analyses faisables sur le LCR : glucose, protéines, lactate, chlore * Xanthochromie : Présence de bilirubine dans le LCR évaluée par spectrophotométrie pour le Dx d'une hémorragie sous-arachnoïdale (éch 12h post-hémorragie) * Indication d'un prélèvement de LCR: * Hémorragie sous-arachnoïdienne * Méningite * Cancer * Maladie auto-immune : sclérose en plaque * Alzheimer * **ÉCHANTILLON PRÉCIEUX, TOUJOURS L'ANALYSER**

Answer 28

_Dosage du glucose dans le LCR:_ * VR : 2,5 - 4,4 mmol/L (60-80% du glucose sanguin) * Équilibre entre LCR et sang : prend 4h * Interprétation du glucose LCR toujours avec glucose sanguin (prélevé au même moment) * Utilité clinique : * Distinguer méningite bactérienne de virale * Bactérienne : glucose \< 1,1 mmol/L * DIminution du glucose LCR peut être d'origine infectieuse ou non * Méthode : même méthode que glucose sanguin et urinaire (multianalyseur)

Answer 29

Dosage des protéines dans le LCR: * VR : 0,1-0,55 g/L * Varient avec l'âge (plus élevées chez les enfants) * Augmentation = indicatif * Inflammation * Synthèse intrathécale * Destruction des tissus cérébraux * Ponction lombaire traumatique * Méthode : protéines urinaires (multianalyseur) * Indication clinique : * Inflammation * Sclérose en plaque : Faire test de bande oligoclonales * Vérification de l'intégrité de la barrière sang-LCR * Ratio entre prt LCR / prt sang * \< 9 : barrière intacte * \> 30 : altération sévère

Answer 30

_Bandes oligoclonales_ : électrophorèse des protéines du LCR en comparaison avec les protéines du sang * Permet d'identifier la synthèse de protéines intrathécale (production d'Ig anormales) * Résultat anormal : * identification de 2 bandes de protéines dans le LCR qu'on ne retrouve pas dans le sérum * Sclérose en plaque : \>90% ont bandes oligoclonales * Pas seulement sclérose en plaque qui produit des bandes oligoclonales : lupus, HIV, ...

Answer 31

BUN : Blood urea nitrogen * Indication clinique : * Évaluation de maladie rénale * Évaluation du statut nutritionnel * Dx différentiel atteinte rénale vs pré-rénale * VR varient selon âge et sexe * Adultes : 3-8,5 mmol/L

Answer 32

* Indication clinique : * Confirmer Dx de fibrose kystique (gold standard) * Procédure en 2 temps : 1. **Stimulation de la sudation** : ionophorèse à la pilocarpine. Système avec faible courant électrique pour conduire la pilocarpine dans les glandes sudoripares 2. **Collecte de la sueur** * Avec papier filtre/gaze ou avec microtube * Collecte souvent au niveau de l'avant bras (cuisse si c'est un bébé) * Méthode de dosage des chlorures: Titration coulométrique (méthode de référence) * ISE pas assez sensible dans les basses valeurs * Résultats: * \< 30 mmol/L : Fibrose kystique peu probable * ***_Résultat négatif n'exclut pas Dx_**. Certaines formes ont Cl^- normales* * 30-60 mmol/L : Probabilité intermédiaire * Reprise du test à l'intérieur de 2 mois recommandé * \> 60 mmol/L : Dx de fibrose kystique * (!) Fausses augmentations possibles \*\* Si Cl^- \> 160 mmol/L : Contamination ou erreur (impossible)

Answer 33

* Rx anti-arrythmique * Seul Rx qui n'allonge pas le segment Q-T de l'ECG * Anastésique local * Rx risqué, donné seulement lorsque l'évaluation permet de croire que les bénéfices surpassent les risques dans les cas d'infarctus du myocarde * TDM : toxicité cardio et SNC, index thérapeutique étroit

Answer 34

* Coloration des graisses avec un colorant * Observation de la lame au microscope * Possible de chauffer la lame pour répartir davantage l'échantillon sur la lame * Indication:

Answer 35

* Indication : * Diagnostic et Dx différentiel de l'hyperandrogénisme * Dx du CAH * Suivi Tx CAH

Answer 36

* Inhibiteur de protéases * Synthétisée au foie * 51 kDa, plusieurs variants génétiques (75) * Méthode: immunoturbidimétrie/néphélométrie * Augmenté en cas d'inflammation (réactant de phase aiguë) * Peut être augmenté en cas de grossesse, lors de la prise de contraceptifs oraux, désordres inflammatoires, condition maligne, exercice * Déficit en A1AT : * Maladie pulmonaire (emphysème) * Cirrhose du foie * fréquence homozygote = 1 / 1600

Answer 37

* Alpha-2 globuline * Protéine impliquée dans le métabolisme du cuivre : Contient 95% du cuivre sérique * Produite au foie * Synthèse protéique : chaine polypeptidique à laquelle le Cu est ajouté via l'ATP7B * Dégradation rapide lorsque absence de ATP7B et/ou Cu * Multation de l'ATP7B = maladie de Wilson * Niveau de céruloplasmine bas * Conditions qui **_augmentent_** la production de la céruloplasmine : * Prise de contraceptifs oraux * Cholestase * Inflammation (réactant de phase aiguë)

Answer 38

_Haptoglobine_: * Alpha-2 globuline produite au foie * t1/2 normal : 5,5 jours * Protéine de liaison de l’Hb libre * Fortement diminué/absente en cas d’hémolysein vivo * Dégradation du complexe haptoglobine-Hb * Prévient l’excrétion rénale de l’Hb (recycle hème et fer) _Indication_ : hémolyse intravasculaire (transfusion) _Méthode_: Immunoturbidimétrie, néphélométrie

Answer 39

* Protéine normalement filtrée et réabsorbée au niveau tubulaire * Présence dans les urines = dysfonction tubulaire * Indication : * Marqueur de stadification du myélome multiple * Marqueur de dépistage et de détection de dysfonction tubulaire asymptomatique * Dosage urinaire *

Answer 40

_Électrophorèse_: * Méthode de dépistage des hémoglobinopathies la plus commune * Gel d'agarose * Visualisation des bandes : coloration avec agent qui se fixe aux protéines * Quantification par densiométrie **non acceptable** * Électrophorèse alcaline (pH 9,2) * Ordre de migration (du plus rapide au plus lent) : l'Hb H, l'Hb N, l'Hb I, l'Hb J, l'Hb A, l'Hb F, l'Hb S et l'Hb C. * Hb D et Hb G co-migrent avec Hb S * Hb E, Hb O et Hb A2 co-migrent avec Hb C * Électrophorèse acide (pH 6.4) * Effectuée lorsque bandes anormales détectées à pH 9.2) * Ordre de migration (de la cathode vers l'anode, du plus rapide au plus lent) : Hb F, Hb A, Hb S et Hb C * Hb D, Hb G, Hb I, Hb J, Hb O, Hb A2 et Hb E co-migrent avec Hb A. _Électrophorèse à focalisation isoélectrique (IEF):_ * Meilleure résolution, mais + $$$ et + complexe * Polyacrylamide avec gradient de pH * Ordre d'élution : similaire à celui de l'électrophorèse de l'Hb alcaline, sauf que Hb D, Hb G et Hb S sont résolues les unes des autres _IEF capillaire:_ * Séparation par immunoélectrophorèse * Détection et quantification spectrophotométrique à 415 et 450 nm * Variants d'Hb distinguée selon leur point isoélectrique et leur temps de migration _Électrophorèse capillaire:_ * Séparation dans un tampon alcalin * Détection de l'Hb à 415 nm * Identification des variants selon temps de rétention _HPLC_ * Méthode de choix pour dépistage des hémoglobinopathies et thalassémies * Résine échangeuse de cations * Détection à 415 et 690 nm * Quantification de HbA2 et HbF (aire sous la courbe) * Identification présumable des variants communs d'Hb * Les temps d'élution peuvent changer s'il y a présence de beaucoup de variants

Answer 41

Complexes macroscopiques d'enzymes formés par la liaison intermoléculaires soit via des anticorps endogènes ou une autre molécule (Ex: Rx, lipoprotéine) Molécules ayant tendance à former des complexes macroscopiques: amylase, CK, transaminases * **Macro-CK** : CK élevé en raison de l'incapacité d'éliminer la macroenzyme au niveau rénal * **Macro-amylase** : amylase élevée en raison de l'incapacité d'éliminer la macroenzyme au niveau rénal; majoritairement complexé avec une IgA * **Macro-lipase** * **Macro-ALP** * **Macro-LDH** : majoritairement complexé avec une IgA * **Macro-prolactine** * **Macro-ALT** * **Macro-AST**: majoritairement complexé avec une IgG _Méthode de dosage_: * Précipitation au PEG: 1 tube précipité et 1 tube ctrl * incubation 37°C et centri * si \>90% de l'enzyme est précipité : Macroenzyme * Filtration sur gel : chromatographie d'exclusion de taille * Macro-enzyme non retenues sur la colonne

Answer 42

* Recherche de bilirubine dans le LCR * Indication d'une hémorragie sous-arachnoïdienne (HSA) * Prélèvement de LCR \<12h post-hémorragie * Protéger éch de la lumière * Éviter pneumatiques * Dosage spectrophotométrique * Centrifugation de l'éch * Stocker surnag à 4°C et à l'abris de la lumière * 100% sensible * F+: Ponction traumatique * Interprétation avec bili sérique

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