¿Qué es la proteómica?
Rama de la biología molecular que estudia el conjunto completo de proteínas expresadas por un genoma, célula, tejido u organismo
¿Cuál es el objetivo principal de la proteómica?
Entender la expresión, función, regulación e interacción de las proteínas en condiciones fisiológicas y patológicas
¿Qué tipo de modificaciones proteicas analiza la proteómica?
Modificaciones postraduccionales: fosforilación, glicosilación y metilación
¿Qué permite comparar el proteoma de una célula normal vs. una cancerígena?
Identificar proteínas que cambian su expresión y que pueden ser biomarcadores o blancos terapéuticos
¿Qué separa la electroforesis mono y bidimensional?
Proteínas por su carga, punto isoeléctrico y masa molecular
¿Cuál es la función principal de la electroforesis en proteómica?
Aislar proteínas individuales
¿Qué analiza la espectrometría de masas (MS)?
La masa exacta y la composición de proteínas y péptidos
¿Cuál es la función de la espectrometría de masas?
Identificación y cuantificación de proteínas
¿Qué son las técnicas in silico en proteómica?
Uso de bases de datos bioinformáticas para comparar secuencias de proteínas
¿Para qué sirven las técnicas in silico?
Predicción de estructura, función o interacción de proteínas
¿Cuál es el primer paso en el análisis proteómico complementario?
Separar proteínas por electroforesis
¿Qué se hace después de la electroforesis en el análisis proteómico?
Se identifican las características de las proteínas por espectrometría
¿Por qué es clave la separación en proteómica?
Porque una célula contiene miles de proteínas diferentes
¿Qué buscan las estrategias de fraccionamiento?
Reducir complejidad de la muestra y disminuir tiempo de análisis
¿Qué técnica se usa para estudiar complejos proteicos?
Purificación por afinidad seguida de espectrometría de masas
¿Cómo funciona la purificación por afinidad?
Se usa un anticuerpo específico para aislar la proteína de interés (cebo) junto con sus proteínas unidas
¿Qué revela la purificación por afinidad + MS?
Complejos proteicos y redes de interacción celular
¿Qué busca la purificación de proteínas?
Obtener una proteína lo más pura posible, eliminando las contaminantes
¿Según qué diferencias se eliminan las proteínas contaminantes?
Diferencias fisicoquímicas: tamaño, carga e hidrofobicidad
¿Con qué se monitoriza el progreso de la purificación proteica?
SDS-PAGE (electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio)
¿Cuál es la primera etapa de la purificación proteica?
Homogeneización/extracción: romper células para liberar proteínas
¿Qué es el fraccionamiento en purificación proteica?
Separar proteínas según propiedades físicas
¿Qué es la purificación en el proceso de análisis proteico?
Aislar la proteína deseada
¿Cómo se verifica la pureza de una proteína?
Confirmando pureza con SDS-PAGE